Екатерина Мириманова: Система минус 60. Меню на каждый день. Завтраки, обеды, ужины
Екатерина Мириманова
Система минус 60. Меню на каждый день. Завтраки, обеды, ужины
© Хуан Карлос Гамбоа Майне, иллюстрации, 2013
© Мириманова Е. В., текст, 2013
© Оформление. ООО «Издательство «Эксмо», 2013
* * *Если вы впервые слышите о системе «Минус 60», скорее всего, вы еще не знаете о том, как изменится в ближайшее время ваша жизнь. Отныне вы можете забыть про диеты, отсутствие сладостей, мучного и жирного в рационе и, наконец, почувствовать себя нормальным человеком. Вы сможете перестать облизываться, глядя на тортики и жареную картошку, и методично выбрасывать все вкусности из холодильника, которые приносят гости, сразу после их ухода. Шесть лет назад система «Минус 60» стала настоящим открытием в области диет, и с каждым днем в наши ряды вступают все новые последователи. На сегодняшний день их уже более трех миллионов! «В чем же секрет?» – спросите вы.
Система «Минус 60» – это не просто правильное питание, да и вообще ее нельзя с уверенностью отнести к категории здорового образа жизни. Система – это прежде всего философия, пропагандирующая любовь к себе и заботу о своем организме и интересах.
Именно поэтому данная книга так отличается от многих других. Ведь, как правило, в книгах, посвященных диетам, представлены рецепты диетических блюд, в которых главное – польза, а не вкус. Здесь же вы найдете такие «кулинарные изыски», как пирожки, печенья, пиццы и салаты с майонезом.
«Невероятно! – воскликнете вы. – Если все это есть, я никогда не похудею!» Ошибаетесь! Доказав обратное на собственном примере, похудев на 60 кг, я и по сей день сохраняю форму, придерживаясь системы. То же самое могут сказать сотни тысяч последователей.
«Наверное, нужно соблюдать какие-то сложные правила, считать калории или взвешивать порции?» Вовсе нет. Достаточно ознакомиться с пунктами, приведенными ниже, а также обедать и ужинать в соответствии со списками продуктов, приведенными ниже.
С помощью данной книги питаться по системе будет еще проще, потому что каждый рецепт сопровожден специальной меткой, чтобы вы знали, можно ли его есть только на завтрак или же он подходит для обеда и ужина.
Именно поэтому данная книга станет отличным подарком для тех, кто уже давно придерживается системы. Ведь с ее помощью любой сможет легко составлять свое меню на день и даже на неделю, совершенно уверенный, что питается по системе.
Для тех, кто слышит о системе впервые, и для тех, кто знаком с ней только поверхностно, предлагаю ознакомиться с часто задаваемыми вопросами и списками продуктов для завтраков, обедов и ужинов.
ДО 12.00 МОЖНО ВСЕ!!!! ДА, И БУЛОЧКУ, И КОНФЕТЫ, И ТОРТ, И… ДАЖЕ ТО, О ЧЕМ ВЫ ХОТИТЕ СЕЙЧАС СПРОСИТЬ: «МОЖНО ЛИ ЭТО ДО 12.00?»
1. Когда надо завтракать?Сразу после пробуждения. Это не значит, что надо, встав с постели, сразу нестись на кухню. Все должно быть в разумных пределах.
Вы обязательно должны завтракать, чтобы своевременно активизировать обменные процессы в организме.
Если утром завтрак «не лезет», советую съесть хоть что-нибудь, можно сухарик с сыром, например, а потом уже полноценно позавтракать. Но помните, что к обеду вы должны хотеть есть!
2. О количестве завтраков.В идеале завтрак должен быть один. Но это не значит, что он может длиться с 8.00 до 11.59. Второй завтрак допустим, если:
• первый завтрак ранний;
• с утра «не лезет» еда;
• слишком большой перерыв между завтраком и обедом и вы не можете продержаться до обеда.
Помните, что если вы едите два раза, то не должно быть двух полноценных завтраков! К обеду должен быть аппетит!!!
Список продуктов для обеда
Что и с чем можно сочетать?Нельзя сочетать продукты из группы «Разрешенные мясные и рыбные продукты» (кроме яиц, их можно немного по необходимости добавить) с:
– картошкой, макаронами, бататом, кукурузой*, кус-кусом, бобовыми*, криспами или хлебом.
* исключения: если в вашей овощной смеси немного свежей кукурузы или зеленого горошка, то такую смесь можно сочетать с мясной группой.
Все остальные сочетания продуктов разрешены. Но не забывайте, что мы худеем и во всем должна быть мера.
Читать дальшеЕкатерина Мириманова — Минус 60.
Система и рецепты в одной книге читать онлайн бесплатноЕкатерина Мириманова
Минус 60. Система и рецепты в одной книге
© Мириманова Е. В., 2011
© Оформление. ООО «Издательство «Эксмо», 2015
* * *Часть I
Система минус 60, или Мое волшебное похудение
Вступление
Несколько слов о том, зачем я написала эту книгу
Наверное, первый вопрос, который возникает у тех, кто открыл эту книгу, – откуда взялось такое название? Конечно, я могла бы создать еще одну авторскую систему – например «Миримановскую», – однако мне кажется, что это несколько банально. Сколько подобных существует на свете? Обещать, что вы сбросите вес легко, без усилий, раз и навсегда, мне не хотелось потому, что когда-то я тоже искала книги о похудении, и подобные заявления вызывали у меня не более чем усмешку. Тогда я решила дать системе название, непосредственно связанное с реальностью, какой бы невероятной она ни казалась.
Я похудела достаточно сильно – на 60 кг и сделала это, не применяя никаких противоестественных способов.
Эта система во многом отличается от тех, о которых вы уже читали или слышали. Думаю, ни для кого не секрет, что большинство книг по диетологии и похудению написаны мужчинами. То ли это связано с тем, что среди сильного пола больше маститых докторов наук, то ли с тем, что они чаще добиваются своего и доводят издание книг до конца. Однако факт остается фактом: Поль Брэгг, Монтиньяк, Аткинс, Протасов – а ведь это авторы самых известных именных диет нашего времени. Первое отличие моей книги от других подобных – она написана женщиной.
Однако одно дело – изучать теорию, возможно, даже опробовать на своем – мужском – организме какую-то диету. Совсем другое – самой пройти через это, прочувствовать всю боль, которую испытываешь, когда осознаешь, что выглядишь далеко не так, как раньше. В сущности, не столь сложно правильно питаться, сколько тяжело перестроить себя на нужный лад, отбросить все сомнения и начать последовательно добиваться цели. Итак, второе отличие данной книги от прочих – я сама прошла через все, что описываю и рекомендую. Я знаю, с какими трудностями вы можете столкнуться и что будете чувствовать в определенные моменты.
Когда я только думала о том, чтобы сбросить вес, я начала интересоваться последними достижениями в этой области. Я просмотрела все интернет-ресурсы в поисках нужной информации, но так и не нашла ничего принципиально нового. Мои знакомые постоянно сидели на каких-то очень строгих диетах из разряда «в понедельник огурчик, во вторник помидорчик, в среду кремация». Я в свое время тоже голодала неделями, но, как только начинала вновь полноценно питаться, вес нарастал с невероятной скоростью и в конечном итоге превосходил прежние показатели.
Существует еще одна категория изданий, относящихся к тематике снижения веса. Начинаются они, как правило, так: «Вы можете есть все, что угодно, и при этом худеть». Однако когда вы открываете книгу, то видите, что на самом деле разрешено далеко не все, более того, вы наверняка найдете рецепты блюд, которые рекомендуется употреблять. И скорее всего, это будет что-то вроде «запеченный хвост лосося с артишоками под соусом бешамель». Давайте посмотрим правде в глаза: у современной женщины, растящей пусть даже одного ребенка, нет времени и желания ежедневно заниматься кулинарными изысками. Да и не всегда рекомендуемые продукты можно найти в супермаркетах России. В этой книге даны рекомендации, которые вы в состоянии выполнить. При этом здесь вы не встретите конкретных рецептов, поскольку имеете полное право питаться теми продуктами, которые предпочитаете, только немного в иной системе, нежели вы привыкли.
Моя система также подразумевает новое отношение не только к себе, но и к жизни в целом. Без этого вы вряд ли до конца осознаете свои ошибки и сумеете удерживать вес в норме. Современные люди настолько разучились прислушиваться к самим себе – вечно спешат, заняты выполнением огромного количества нужных и не очень дел, – что не воспринимают свой внутренний голос. Так, из совершенно естественного утоления голода потребление пищи превращается во вредную привычку, ведущую к необратимым внешним и внутренним изменениям. Женщина ест все больше и становится все толще. Появляются хронические боли и болезни, самочувствие становится все хуже, вы пытаетесь разорвать этот порочный круг, но не можете, пытаетесь снова и опять терпите неудачу. Надежда на то, что что-то можно изменить, тает с каждым днем. В конечном итоге вы просто опускаете руки. Хотя для того, чтобы дело сдвинулось с мертвой точки, нужно просто посмотреть на некоторые проблемы под иным углом и внести небольшие коррективы в каждодневные привычки.
Идея написания этой книги родилась не сразу. Сначала была просто цель – похудеть.
Страница не найдена — Confetissimo — женский блог
Маникюр и педикюр
Стразы невероятно красивый материал, который своим блеском привлекает много внимания со стороны. Дизайн с
Волосы и прически
Насладиться истинной красотой коричневых волос, может каждая женщина, тем более, когда есть выбор среди
В погоне за красотой, многие женщины не знают, что же выбрать в следующий раз
Макияж
Стиль в одежде
Мода не стоит на месте, потому она предлагает все новые и новые варианты сочетания
Маникюр и педикюр
Маникюр для подростков должен быть лишен всякой вульгарности и броскости. Современные дизайны позволяют без
Отзыв о Диета Екатерины Миримановой минус 60 отзывы, рецепты, меню. (сайт mirimanova.
ru) *Автором методики похудения является менеджер Екатерина Мириманова. Система “Минус 60” предлагает очень простые принципы похудения. Диета позволяет сбросить от четырех до шести килограммов в месяц.
оценка 5 из 5. Оценок 1 Количество отзывов : 6Количество проголосовавших : -1
Ссылка | mirimanova.ru |
---|---|
Автором методики похудения является менеджер Екатерина Мириманова. Система “Минус 60” предлагает очень простые принципы похудения. Диета позволяет сбросить от четырех до шести килограммов в месяц.
Преимущества диеты.
- Возможность есть сладкое и не отказываться от любимых продуктов.
- Организм не будут “насиловать” литрами воды.
Дабы сбросить лишние килограммы и иметь ухоженный вид нужно не только соблюдать правильный рацион, но и следовать нескольким правилам.
Правила системы похудения.
- Выполнение физических упражнений. Разрешается не ходить в спортзал, но обязательно уделять несколько минут тренировки дома. Можно заниматься в любое удобное время, но делать это нужно каждый день.
- Пристальное наблюдение за кожой тела. Из -за того, что тело худеет, кожа начинает обвисать и появляются растяжки. Для избежания этой проблемы нужно обрабатывать тело скрабом из кофейной гущи (можно брать любой другой скраб). Также следует применять крем для лица и тела, чтобы увлажнить кожу и придать ей тонус.
Принципы рациона.
- не пропускать завтрак;
- не отказываться от кофе, а просто уменьшить количество сахара в нем;
- есть сладкое только утром;
- вместо круглого риса есть пропаренный рис;
- только ржаный хлеб;
- картофель и макароны только в обед;
- легкий ужин до 6 вечера.
Диета Екатерины Миримановой минус 60 отзывы, рецепты, меню. — отзывы реальных людей расположены ниже. Вы можете добавить свое мнение
Наталья Вахрамеева -1
вот мне много скидывать, думаю слезет быстро!) я уже до этого скинула 6кг но просто бегала и после 6ти не ела, решила сесть на эту)вот сижу купила приправку для супа залила кипяточкрм))суп без всего называется))) выпила полторашку минералки)сыворотку и чай зеленый)пока чувствую себя хорошо)
13. 01.2020Ксения Назарова 0
А кг быстро возвращаются? Если начать нормально питаться
13.01.2020Игорь Веселовский 0
всем привет) сижу на этой диете 5 день) отличная она я Вам скажу) оч легкая. но я внес все же свои поправки) ничего отрицательного от нее не замечаю, только легкость)
13.01.2020Нина Ризничук 0
заканчивается третий день на этой диете. Пока -3 кг, но конечно это, как обычно, за счет жидкости… Посмотрю, что будет дальше.
13.01.2020Анастасия Кузнецова 0
круто,с понедельнка сажусь на эту дету!))
13.01.2020Светлана Зинченко 0
у меня за три дня ни грамма не скинула(((((
13. 01.2020Оставьте свой комментарий:
Система Екатерины Миримановой «Минус 60». Обзор и анализ.
Система Екатерины Миримановой «Минус 60»Общая идея системы, по утверждению автора, – отсутствие насилия над собой, как в питании, так и в физических нагрузках, максимальная простота и удобство. Схема распределения продуктов питания в течении дня — перевернутый треугольник (плотный завтрак, умеренный обед, легкий ужин). И в полной мере отражает фразу «Завтрак съешь сам, обед раздели с другом, а ужин отдай врагу».
Цель данного обзора — изложить основные правила системы, проанализировать примерное недельное меню на сбалансированность, рассмотреть психологические и организационные (удобство, понятность, простота) аспекты (поскольку придерживаться ее необходимо длительное время), выявить плюсы и минусы.
Количество приемов пищи – 3, в случаях
сильного голода допускаются небольшие перекусы.
ЗАВТРАК. Завтрак
предполагается один, сразу после пробуждения. Если пробуждение было
ранним, можно добавить перекус (50 грамм любого продукта).
До 12.00 есть можно абсолютно все, не задумываясь о качестве пищи в
пределах 250-400 граммов, без учета напитков. Исключение составляет
молочный шоколад во всех проявлениях и любой алкоголь (кроме
красного сухого вина). Завтрак – самый объемный по калориям прием
пищи, однако, он является и наиболее вариативным. За счет
регулирования количества «вредностей» на завтрак можно заметно
влиять на общий энергетический и нутриентный баланс дня. Также в
завтрак можно включить которые из тех продуктов, которые не
являются вредными (например, орехи, семечки, нерафинированные
масла), но в силу высокой калорийности запрещены после 12.00.
ОБЕД (до
14-15.00). После 12.00 правила питания заметно ужесточаются. Из
рациона исключаются практически все высокожировые и жаренные на
масле продукты, колбасы (кроме вареных, редко), орехи, семечки и
т.п.) и высокоуглеводные продукты (шлифованный рис и прочие крупы
(кроме гречки), все мучное, белый хлеб заменяется ржаными криспами
или сухариками, под запретом все сладости, мед, бананы и прочие
сладкие фрукты, консервированные фрукты и овощи). Картофель и
макароны из твердых сортов пшеницы допустимы 1 раз в неделю,
бобовые – до 14.00. Синтетические заменители сахара также не
приветствуются. Чай/кофе после полудня – без молока и сахара.
Обед более-менее традиционен с точки
зрения ПП. Допустимо съесть и первое, и основное блюдо, и салат
и/или гарнир, и даже десерт из списков разрешенных продуктов.
Однако стоит помнить об ограничении объема порции и правилах
сочетания продуктов (запрещено сочетать
мясо/рыбу/птицу/морепродукты с картофелем, бобовыми, кукурузой,
макаронами, кус-кусом, мучными изделиями; с рисом и гречкой –
можно). Более детально правила и списки разрешенных продуктов – в
таблице в прикреплённом файле.
УЖИН (до 18.00 — для людей, который ложатся спать до полуночи, 20.00 – для тех, кто засыпает в 2.00-3.00 или работает в ночную смену). Максимально легкий прием пищи, предусматривающий строгие правила сочетаемости и большой список ограничений по количеству разрешенных продуктов (подробная таблица – в прикрепленном файле). Возможны 7 вариантов сочетаний продуктов для ужина – фрукты и овощи, фрукты и крупы, фрукты и молочные продукты, овощи и молочные продукты, овощи и крупы, мясо/рыба/морепродукты (только с приправами – зелень, сок лимона и т.п) и сыр (любой жирности, 50 гр) и ржаные криспы (хлебцы ) 3-4 шт. К каждой их этих групп прилагается группа разрешенных напитков. Строго запрещены соления, копченая и маринованная пища, жареное.
Дополнительно:
· Разгрузочные дни
не рекомендуются.
· Обязательны
ежедневные физические упражнения, хотя бы 15-20 минут.
· Количество соли и
жидкости автор предлагает потреблять согласно желанию, не
рекомендуется пить насильно, или специально ограничивать
соль.
· Разграничиваются
вода и напитки. Жажду рекомендуется утолять чистой водой.
· Рекомендован
прием поливитаминных препаратов.
Дополнительно хочу отметить, что в
изначальном варианте системы ограничение порций по весу не
предусматривалось (предлагалось проявлять умеренность, есть до
сытости, но не переедать). До 12.00 есть можно было, цитирую
«абсолютно все, не задумываясь о количестве и качестве пищи (хоть
целый торт, если он в вас влезет)». Однако, получив в подарок за
подписку брошюру с меню, выяснилось, что объем порций ограничен
250-350 граммами даже для завтрака. Задав соответствующий вопрос на
форуме официального сайта, я получила ответ — 250-400 грамм без
учета напитка. Потому при составлении меню я буду опираться на эти
цифры. Таким образом, со временем были введены новые ограничения, а
также необходимость подсчета хотя бы веса продуктов. Также хочу
сказать, что представленное меню – это плод воображения далеко не
самого образцового худеющего (на завтрак указано максимально
допустимое количество вредной или излишне калорийной пищи, а объем
порций всех приемов пищи максимально возможный) для того, чтобы
понять, что способна данная система питания при худшем раскладе
(однако, и этот расклад, разумеется, вписывается в правила
системы). Также старалась воздерживаться от использования слишком
уж явных МЗРовских лайфхаков (типа 10г. печени трески, 3 г. сушеной
ламинарии и т.п. ), ибо среднестатистический фолловер системы
-60 вряд ли о них знает.
Вот как примерно может выглядеть дневной рацион
Анализ меню методом МЗР
1) Баланс калорий. На первый взгляд, меню кажется
сытным, а общая недельная калорийность рациона превышает
рекомендуемую максимальную норму для похудения на 12%. При этом
недельный дефицит около составляет 1700 ккал (-250 ккал в день),
что в принципе, приемлемо, особенно, при наличии физических
загрузок на такое же количество калорий. Однако, неравномерно
распределение калорий (де-факто), большие промежутки между приемами
пищи, ограничение объема порций ставит под вопрос субъективное
ощущение сытости и комфорта.
2) Соотношение БЖУ. Жиры превышают рекомендуемую
максимальную норму на 15% (явно за счет фастфудно-джанкфудных
завтраков), и, очевидно, этот перебор жиров из вредной пищи дает и
общий излишек калорий, и перебор по насыщенным жирным кислотам, и
дефицит ненасыщенных. Омега-3 в норме.
Белки
также превышают норму (на 19%), однако, для худеющего человека, да
еще и при наличии физических нагрузок данные показатель не является
критичным. Употребление всех видов мяса, рыбы, морепродуктов и
субпродуктов, яиц и творога позволят получить удовлетворительный
аминокислотный набор.
Углеводы
в пределах допустимого коридора.
3) Наблюдается
существенный дефицит клетчатки, что
может привести к некоторым проблемам с пищеварением (особенно, при
несколько избыточном потреблении белка).
4) Вода и NaCl – потребляются худеющим согласно
индивидуальным потребностям.
5) Витамины и минералы. Общий рейтинг рациона за
неделю – 85%, что, по рекомендациям МЗР, может считаться минимально
оптимальным.
За неделю такого питания ваш организм получит
полную норму В-каротина и витамина А,
что крайне важно для поддержания в здоровом состоянии кожи, зрения,
иммунитета (хотя, витамин А в значительном избытке, что может
привести к головным болям, сонливости, выпадению волос, сухости
кожи, тошноте. Однако, подобные явления все же скорее связаны с
употреблением избыточных доз препаратов ретинола или редких
продуктов питания – печени моржа и тюленя, например).
Витамины группы
В. В полном объеме организм получит только витамины В2 и
В12, а также около 90% В6, что в сумме поможет поддерживать
иммунитет (этому поспособствует и достаточное количество
витамина С), нормальное
кроветворение, здоровье кожи и слизистых.
Вместе с тем, наблюдается дефицит витаминов В1, В4 (холина), В5 и
В9, имеющий огромный спектр биологической активности, дефицит
которых может негативно сказаться на здоровье сердечно-сосудистой и
нервной систем, почек и печени, правильном усвоении БЖУ, синтезе
ряда гормонов и т.д.
Дефицит витамина D (60%) негативно
влияет на усвоение кальция и фосфора
(которые как раз в норме) – важнейших минералов для здоровья
костной ткани. Недостаток витамина Е,
подкрепленный дефицитом цинка могут
привести к нарушениям в репродуктивной сфере и кроветворении, а
дефицит витамина H и кремния (Si) не добавит здоровья нашей
коже.
В числе отстающих также йод (нарушение синтеза гормонов щитовидной
железы), магний (гипомагниемия
частный спутник сердечно-сосудистых проблем), хром (дефицит которого отрицательно влияет на
углеводный обмен и повышает риск развития толерантности к глюкозе)
и фтор (способствует развитию кариеса
и стиранию зубной эмали).
В достаточном объеме организм получит
натрий и хлор, кальций и фосфор, калий, медь
и марганец, селен, кобальт и железо.
Данные результаты анализа общих положений
системы и меню позволяют выделить ряд положительных и отрицательных моментов (подаю
общим списком, т.к. некоторые пункты трудно однозначно отнести к +
или -):
1)
— В книге, в интернет ресурсах отсутствуют какие-либо
убедительные обоснования целесообразности всех описанных
ограничений и сочетаний. Автор руководствуется фразами типа
«вечером все органы переходят в щадящий режим» для аргументации
необходимости легкого ужина, а на вопрос, почему именно такие
сочетания продуктов — «потому что такие правила». Однако, очевидно,
что комбинации продуктов и объем порций продуманы таким образом,
чтобы человек, следуя им, просто не мог переесть (отсекаются
какие-то высококалорийные компоненты приема пищи — хлеб,
сахаросодержащий десерт, высокоуглеводный гарнир и т.п., которые в
сумме давали бы излишек калорий).
2) — Понятие о балансе калорий,
соотношении БЖУ, витаминно-минеральном и водно-электролитном
балансе отсутствуют в принципе. Таким образом, у худеющего человека
формируется лишь навык следования правилам, в не вдумчивый подход к
питанию и осознание того, что и зачем он ест.
3) — Несмотря на заявленную простоту,
список правил сочетаний и ограничений на вторую половину дня
внушителен. Новичкам рекомендуется распечатать таблицы и списки и
всегда иметь их под рукой.
4) — Жесткая привязка приемов пищи ко
времени, независимо от распорядка дня худеющего человека. Даже для
людей, работающих в ночную смену, еда в ночное время запрещена
(допустимо лишь передвинуть ужин на 19-20. 00).
5) +Отсутствие необходимости
каких-либо подсчетов, кроме общего приблизительного контроля веса
пищи (система не накладывает жестких ограничений по количеству
КБЖУ). Данный подход может оказаться более простым и удобным с
меньшими временными затратами (особенно для людей, которые не любят
вести учет).
— Однако, с другой стороны, ведение
учета потребленной пищи позволяет более четко контролировать
процесс и осознать объемы и структуру рациона, выявить и исправить
дисбаланс питательных нутриентов. Многие люди не понимают, сколько
они потребляют пищи и калорий, пока не начнут записывать и
считать.
6) — Сильная диспропорция в распределении калорий
в течение дня. И, хотя по рекомендации системы, все приемы пищи
должны быть равномерно насыщающими, де-факто, около половины (50,8%
в среднем за неделю) нормы калорий приходится на время до полудня,
на обед и ужин примерно 24% и 21% соответственно. В связи с этим
есть риск обострения чувства голода в вечернее время, т. к. ужин
предполагается ранний и весьма легкий по количеству калорий.
7) + Возможность употреблять любимую еду, с
одной стороны, привносит ощущение психологического и телесного
комфорта, однако,
— может мешать формированию
более здоровых привычек питания и отвыканию от потребления вредных
продуктов в значительных объемах.
Выводы
Как продемонстрировал анализ меню системы
-60 методом МЗР, показатели КБЖУ и нутриентный профиль могут
считаться удовлетворительными (если честно, то мои МЗРовские
рационы, когда я не прикладываю специальных усилий для высокого
рейтинга, в среднем не намного лучше), даже с учетом худшего
расклада (потребления действительно большого количества вредной
пищи на завтрак). При более разумном подходе возможно
усовершенствование меню за счет замещения части вредной пищи более
полезными продуктами (просмотрев форум системы и группы в соцсетях,
выяснилось, что так оно и есть — большинство похудельцев все-таки
стараются не злоупотреблять вредностями) или добавления
рекомендованных витаминно-минеральных комплексов.
Кроме того, -60 это не краткосрочная диета, где,
как правило, каждый прием пищи четко определен, это система, где
меню можно подбирать исходя из соображений сбалансированности и
предпочтений, и где, по сути, ни один продукт или группа продуктов
не является запрещенным (кроме молочного шоколада и алкоголя),
также не навязывается употребление чего-либо. В связи с этим в
системе присутствует вариабельность меню и потенциал для его
улучшения. С другой стороны, чтобы усовершенствовать рацион, надо
понимать, чего в нем не хватает, а чего с избытком (см. п.
2).
Система обладает рядом правил, ограничений
и неудобств, которые для некоторых людей могут оказаться
неприемлемыми «по духу». Многих из нас МЗР приучил к свободе
сочетания и времени потребления продуктов, желаемому объему порции
и удобному количеству приемов пищи, поэтому после 2,5 лет в МЗР
подобные ограничения кажутся попросту неуместными. Эти факторы так
же важны в любой системе, как и сбалансированность питания. Ибо
простота, удобство, гибкость режима – это залог того, что человек
будет успешно применять его на протяжении длительного времени в
разных жизненных обстоятельствах (лично меня вгоняет в тоску именно
отсутствие свободы – запрет на еду «после шести», три приема пищи,
регламентирование объема порций). И даже гедонистический праздник
вседозволенности с утра того не стоит. Да и, как показывают
современные исследования в области лечения инсулино- и
лептинорезистентности (коими страдают большинство тучных людей),
ударная доза углеводно-жировой пищи с утра явно не на пользу
гормональному обмену. Так что даже эта «фишка» системы является
потенциально вредной и не способствует улучшению ситуации в целом
(хотя, наверное, автор системы подразумевает и надеется, что
худеющий человек все-таки проявит сознательность и не станет есть
на все позволенные 400 грамм торт «Наполеон» или что-то в этом
роде).
Кому может подойти данная система
питания:
1) Людям, имеющим высокий уровень
физической и умственной активности (и, соответственно,
физиологический пик аппетита) в первой половине дня и легко могут
отказаться от позднего ужина.
2) Жаворонкам, которые рано ложатся
спать и рано встают.
3) Людям, которым трудно исключить
или радикально сократить любимые продукты и блюда (принцип двух
зол, из которых чревоугодный затрак – меньшее, чем чревоугодный
ужин).
4) Людям, которые не любят
взвешивать, считать и записывать еду или попросту не умеют этого
делать ( как хорошо, что у нас есть для
этого МЗР! <3)
меню, специфические особенности, результаты и отзывы
Популярность Екатерине Миримановой принесло ее головокружительное похудение на целых шестьдесят килограмм, а выработанные годами правила питания получили свое название — диета «Минус 60». Екатерина лишний раз доказала, что для того, чтобы превратиться в стройную красавицу, совсем не обязательно быть квалифицированным диетологом, главное – слушать свое тело.
Диета «-60» помогает похудеть тысячам женщин по всему миру только потому, что каждое слово, написанное в книге, проверено Екатериной на собственном теле и здоровье. По методу Миримановой, жительницы всего мира, а в особенности стран СНГ, худеют уже как минимум с десяток лет.
Как похудеть, не терзая себя диетами?
Принято считать, что попрощаться с лишними килограммами могут только избранные, те, кто готов полностью отказаться от вкусностей и посвятить свою жизнь гречке и вареной курице без соли. Но автор диеты «Минус 60» на собственном примере доказала, что избавиться от лишнего веса можно, не терзая себя диетами, отказываясь от такого любимого шоколада или жареной картошки. Масса запретов еще никого до добра не доводила.
Широкую известность диета Миримановой «Минус 60» получила благодаря самой Екатерине, которая была живым доказательством того, что перечисленные в диете принципы питания работают. Результат в минус 60 килограмм за полтора года впечатлил многих, по всему миру насчитывается порядка трех миллионов благодарных последователей системы.
Диета «-60» Екатерины Миримановой полностью перевернула понятие о питании, ведь она лишний раз доказала, что можно худеть, не отказываясь от любимых продуктов. Без голода, срывов и стресса для организма.
Какие результаты дает система?
Главная особенность диеты «-60» заключается в том, что соблюдать ее рекомендуется на протяжении всей жизни, а не определенное количество времени, как любые другие диеты. Поэтому, если ваша цель — изнурять себя голодовками и сбросить 10 килограмм за две недели, то система Миримановой не помощник в этом деле.
Только вот если после краткосрочных диет вес возвращается к своему законному владельцу в двойном размере, то отзывы о диете «Минус 60» говорят о том, что при соблюдении всех правил лишние килограммы останутся в прошлом навсегда. Скорость похудения зависит от рациона и начального веса. Например, на завтрак по системе разрешены любые, даже самые вредные продукты, но если каждое утро начинать с жареной картошки, то килограммы будут уходить медленнее. А если добавить в жизнь спорт, то дело пойдет быстрее.
В чем суть системы?
Строится диета Миримановой «Минус 60» на правильном сочетании употребляемых продуктов и времени приема пищи. Полюбилась система тысячам худеющих за то, что диета не предполагает строгих запретов и отказов от любимой еды. Вкратце меню диеты «-60» на неделю включает следующие правила:
- завтрак не имеет ограничений, можно кушать все, что душе угодно, за исключением списка нерекомендуемых продуктов;
- обед состоит из списка предлагаемых продуктов и является весьма разнообразным;
- ужин – самый строгий прием пищи и базируется на принципах правильного питания, состоит только из легких продуктов.
В чем преимущества меню диеты «Минус 60» Миримановой?
Система отличается немалым количеством плюсов, за что так полюбилась множеству последовательниц.
- Система не имеет побочных эффектов, так как построена на принципах правильного и сбалансированного питания.
- Запрещенные продукты фактически отсутствуют, можно себя порадовать даже конфетами, главное – делать это утром. Тогда у лишних килограммов не останется шансов на спасение.
- А если вдруг наступили праздники, то можно даже взять и нарушить систему. Но только во время серьезных праздников, и никак иначе!
- Система «Минус 60» предназначается для живых людей, у которых бывают и стрессы, и срывы, поэтому диету не нужно начинать сначала, а просто продолжать следовать правилам после нарушений.
- Возможность утреннего «праздника живота» — отличный психологический трюк, который даст возможность избежать срывов и неврозов. Облегчается система тем, что здесь совершенно не требуется подсчитывать калории.
В чем же заключаются минусы системы?
Но какой бы замечательной и простой ни казалась диета «-60» Екатерины Миримановой на первый взгляд, она все же имеет свои недостатки.
- Достаточно сложно питаться в кафе и ресторанах, не нарушая принципов. Особенно этот минус касается тех, кто имеет сложный рабочий график, ведь система предполагает трехразовое питание.
- Следует настроиться на то, что похудение займет не неделю и даже не месяц, а более длительное время.
- Перед началом диеты стоит проконсультироваться с врачом, ведь некоторые специалисты отзываются негативно о принципах системы.
Основные правила
Система «Минус 60» имеет множество нюансов, но основные правила всегда остаются неизменны.
- Завтрак – самый важный и необходимый прием пищи. Если день начинается достаточно рано, можно устроить два завтрака – поздний и ранний. Сразу после пробуждения следует съесть что-то легкое, а через несколько часов устроить полноценный плотный завтрак. Но отказываться от завтрака запрещается.
- Самое приятное правило – ограничений в завтраке нет. Самое любимое, самое вкусное есть не запрещается, если делать это на завтрак. Единственный продукт, употребление которого настоящее табу – молочный шоколад. Но скоро организм привыкнет к горькому шоколаду, и даже этот маленький запрет не будет тревожить.
- Самое удивительно правило, что не придется отказываться от сахара и алкоголя навсегда. По правилам диеты, красное сухое вино — совсем не враг, а самый настоящий друг. Что касается сахара, утром от него можно не отказываться, однако для достижения большего результата следует постепенно уменьшать его количество и стараться пить чай и кофе без подсластителей.
- Время своеобразного «праздника живота» заканчивается ровно в 12, но не ночи, как у Золушки, а дня. Только часы пробьют 12 – любимые вкусности автоматически превращаются в запрещенные продукты.
- Ужин пропускать также запрещается, однако последний прием пищи должен быть до 6 часов вечера. Но и в этом случае есть поблажки, если вы ложитесь спать после полуночи, то ужин можно сместить на 8 вечера. Самое важное – гармония, расставляйте завтрак, обед и ужин в соответствии со своим распорядком дня.
- Говорим «нет» перекусам, только три основных приема пищи.
- Вода – неотъемлемая часть системы, как и любой другой диеты, однако через силу заливать в себя очередной стакан воды не стоит. Лучше всегда держать при себе бутылочку или графин воды на случай, если захочется попить, но через силу вливать в себя воду не нужно.
- Не забывайте сокращать порции. Конечно, ограничений по количеству употребляемой пищи система не предусматривает, но процесс пойдет быстрее, если постепенно уменьшать размеры порций. После такой манипуляции желудок значительно уменьшится, что в будущем спасет от переедания и набора веса.
- Нельзя забывать и об уходе за кожей тела, чтобы в будущем не появилось растяжек и обвисшей кожи.
- Рекомендуется подружиться со спортом. Даже пятиминутные, но ежедневные занятия заметно подтянут фигуру уже через месяц.
- И самое важное – мотивация и правильный настрой. Никакая диета не сработает, если не изменить взгляд на питание и не пересмотреть свой образ жизни.
Завтраки
Завтрак характеризуется отсутствием ограничений. Утром можно съесть и кусок торта, и жареную картошку, но не забывайте, что каша с ягодами, орехами и медом будет гораздо полезнее и принесет заряд бодрости и энергии на весь день. Тут выбор только за вами. Отзывы о диете «Минус 60» в большинстве своем положительные только благодаря такому приятному завтраку.
Глюкоза с утра и заряд хорошего настроения обеспечены на целый день.
Что же нужно помнить о завтраке, если вы придерживайтесь системы «Минус 60»?
- Завтрак нельзя пропускать только потому, что утренний прием пищи – страховка от вечернего переедания, что крайне положительно сказывается на фигуре.
- Заменяем молочный шоколад горьким и стараемся свести количество потребления сахара к минимуму. На первых порах белый сахар можно заменить коричневым сахаром или фруктозой.
- Утолять жажду только водой, а не лишними калориями в виде соков и газировок.
На начальном этапе, пока организм только привыкает к новому режиму питания, лучше придерживаться прописанного диетой «-60» Миримановой меню, чтобы по незнанию не нарушить систему и не удивляться отсутствию результата. Со временем вкусовые предпочтения сменятся, а полезные продукты вы начнете узнавать с первого взгляда.
Обед
С обедом уже посложнее, ведь после полудня в силу вступают некоторые ограничения и стандартные правила сочетаемости продуктов.
Каждый обед должен соответствовать следующим правилам:
- Сладости, в том числе выпечка, жирное и жареное уже под строгим запретом. Отказаться также следует от консервированных огурцов и помидоров, так как в них содержится большое количество сахара и соли.
- Масло, майонез и сметана не находятся под строгим запретом. Разрешается добавить одну чайную ложку в салат.
- Отказываться от супов также не следует, однако следует делать выбор. Если суп готовится на мясе, то следует отказаться от картошки, и наоборот.
- Фрукты из обеденного рациона не исключаются, даже несмотря на то, что в них содержится большое количество сахара. Однако предпочтение стоит отдать киви, яблокам, сливам, арбузу, ананасам и цитрусовым.
- Что касается сочетания продуктов, то система разрешает употреблять мясо и рыбу в любых количествах, а сочетать их следует с овощами и крупами, в них содержится клетчатка, которая поможет усвоить мясо. Однако от картошки и макарон придется отказаться. Лучше сделать выбор в пользу салатов из свежих овощей.
- Оптимальное время приема пищи в обед – 13-14 часов.
Ужин
Последний прием пищи – самый строгий и имеет множество нюансов и ограничений. Как бы врачи ни ругали правило худеющих не кушать после 6, данная система предлагает придерживаться этого принципа. Екатерина утверждает, что такое правило позволяет просыпаться утром с чувством голода и не пропускать завтрак. Но не стоит расстраиваться, любые вкусности, которые были приготовлены на ужин, можно попробовать с утра.
Меню диеты «Минус 60» должно соответствовать следующим правилам:
- Ужин не должен состоять из веточки петрушки, но и не должен включать в себя запрещенные продукты.
- Главное правило – не сочетать крупы с мясом или рыбой, употреблять данные продукты следует по отдельности. Сочетать мясо можно с яйцами и бульоном.
- Под запретом бобовые, овощи с содержанием крахмала, грибы.
- Молочные продукты следует сочетать либо с овощами, либо с фруктами.
- Перекусы в системе не разрешаются, однако если приступ голода свалился как снег на голову, то лучше съесть один фрукт или какой-нибудь молочный продукт.
- Способ приготовления – варение и тушение.
Для ужина есть строгие рекомендации, которых следует придерживаться:
- фрукты разрешены следующие: яблоки, цитрусовые, сливы, киви, чернослив, арбуз, ананас;
- овощи разрешены следующие: картошка, горох, кукуруза, грибы, тыква, баклажаны, авокадо;
- любое мясо, рыба и субпродукты;
- из круп разрешены только гречка и рис;
- из молочных продуктов разрешается: творог, несладкий йогурт, кефир, сыр.
Заменять продукты из списка запрещается — это единственное неизменное правило системы «Минус 60». Не нужно пытаться на ужин съесть все продукты из списка, лучше сочетать правильно компоненты и с каждым разом уменьшать порции.
Меню на 7 дней
Размещенная ниже с меню таблица диеты «Минус 60» не является обязательным вариантом, это только пример того, как разнообразно следует питаться и как грамотно можно сочетать продукты. Стоит только включить воображение и отталкиваться от приведенных выше правил, и вы забудете вкус несоленой вареной грудки и научитесь готовить вкусные и полезные блюда. Недельное меню диеты «Минус 60» может быть весьма разнообразным.
Завтрак | Обед | ||
Первый день | Блины с творогом, чай/кофе с горьким шоколадом. | Салат из яблок и морковки, заправленный греческим йогуртом. Основное блюдо – тушеная картошка с зелеными овощами (спаржа, брокколи). | Овощные голубцы, где вместо мяса используются грибы или овощи, закрепить ужин можно зеленым чаем. |
Второй день | Кусок торта или печенье, банан или виноград, кофе/чай. | Овощной борщ без мяса с чайной ложкой сметаны, гречка на воде с салатом из свежих огурцов и помидоров. | Курица, запеченная в рукаве, под бокал сухого красного вина. |
Третий день | Омлет из двух яиц с колбасой, бутерброд с белым хлебом и сыром, чай/кофе. | Сэндвич с авокадо, крем-суп из грибов, сок/компот. | Гречка, сваренная на воде, салат из свежих овощей, чай зеленый. |
Четвертый день | Глазированный сырок, вареный рис, кофе/чай. | Гречка со свининой, салат из свеклы и моркови, зеленый чай. | Запеченная свиная отбивная, салат, чай. |
Пятый день | Яичница с ветчиной, песочное печенье с молоком. | Запеченная рыба с рисом, зеленый чай. | Морепродукты и красное сухое вино. |
Шестой день | Овсяная каша на молоке, небольшой кусок пирога или торта, чай/кофе. | Тушеная фасоль, салат из свежей капусты и огурцов, заправленный ложной масла, чай. | Разрешенные фрукты, творог с кефиром. |
Седьмой день | Творожная запеканка с ложкой варенья, бутерброд с сыром и маслом, чай/кофе. | Куриный бульон с грудкой, запеченной в духовке, компот. | Запеченная красная рыба, вареные креветки, горсть сухофруктов. |
Разнообразие продуктов впечатляет, не правда ли? С таким меню голодать не придется точно. Не забывайте о том, что это лишь примерный набор продуктов. Создавайте свои кулинарные шедевры, отталкиваясь от описанных правил, и лишние килограммы будут таять на глазах.
Система «Минус 60» помогла тысячам женщин распрощаться с лишними килограммами без вреда для здоровья. Счастливицы примеряют в магазинах самые маленькие размеры, покупают самые красивые наряды, блистают и покоряют сердца. Диета женщин после «-60» не должна отличаться от питания во время диеты, правила войдут в привычку, и придерживаться их на протяжении всей жизни будет легко и главное — полезно.
Диета Миримановой «Система минус 60»
Содержание
- 1 Основные правила диеты
- 2 Продукты и блюда на диете
- 3 Питьевой режим диеты
Всякая хорошая диета начинается с правильной мотивации. Екатерина Мириманова советует сначала настроиться на похудение. Заинтересованность в процессе, похвалы для себя и внимательное отношение к своим ежедневным пищевым привычкам – основа диеты. Для того, чтобы начать свое преображение в стройную красавицу, не нужно ждать определенного дня – понедельника или первого числа месяца. Что мы можем сделать для своего похудения сегодня, не откладывая? Составить четкий план, пройти пешком лишний километр, купить полезные продукты, изучить состав диеты. То, что можно делать сейчас, нужно выполнить, и не искать отговорок.
Екатерина Мириманова советует вводить изменения привычек в свою жизнь постепенно. Именно резкие переходы на диетический рацион и непривычный режим тренировок становятся испытанием, которое трудно выдержать. Поскольку лишний вес формировался многие годы, потребуется какое-то время, чтобы вернуть себя в форму.
Для начала придется выбрать тарелки поменьше, определить продукт из числа недиетических, который вы едите чаще всего, и подобрать для него похожую по вкусу замену, но более полезную. Здесь пригодится таблица калорийности блюд. Вам следует ознакомиться с ней, пока вы будете заменять одни блюда другими. Диета Миримановой не предполагает быстрого результата в течение первой недели. Но при ее соблюдении хотя бы месяц вам удастся сбросить до 10 кг.
Продукты и блюда на диетеЭффективная диета Миримановой учитывает изменчивую женскую суть, психику и физиологию. Иногда нам больше хочется сладкого. В другие периоды мы более решительно настроены на похудение и вводим ограничения с легкостью.
Популярные статьи сейчас Показать еще
Главный принцип диеты минус шестьдесят — смотрим на часы. Первый этап диеты — научиться грамотно распределять питание по времени. До полудня можно побаловать себя жареным, сладким и мучным. Есть один запрещенный продукт – молочный шоколад. Пообедать следует до двух часов дня. Это могут быть любые продукты, но не жаренные. Запеченные в духовке или приготовленные на гриле – можно. Допускается добавить в салат сметану или майонез, но не более чайной ложки. Эти добавки — скорее источник удовольствия и сила привычки. Постепенно вам удастся отказаться и от них.
После 12 дня, кроме основной еды, Мириманова рекомендует есть только разрешенные фрукты. К ним относятся цитрусовые, яблоки, сливы, киви, чернослив, а также арбуз в сезон. Для фруктов тоже нужно соблюдать умеренность. Яблок после полудня следует есть не более двух, чернослива не более пяти штук. Список разрешенных фруктов должен быть в памяти, как азбука. После соблюдения диеты хотя бы неделю именно так и будет!
Екатерина Мириманова рекомендует соблюдать принципы раздельного питания для лучшего усвоения продуктов. Например, она не советует есть мясо с картошкой или рыбу с макаронами. Лучшим гарниром считается гречка и овощи, как свежие, так и тушеные на воде или приготовленные на пару. Суп с мясным бульоном рекомендуется готовить без картошки. Если любите картошку, ешьте ее в составе вегетарианских супов. На десерт разрешаются фрукты и сухофрукты, которые вы любите. Самые четкие ограничения касаются ужина. Рекомендуется приготовить на выбор:
- мясо
- гречку
- пропаренный рис
- творог или натуральный йогурт
- салат из овощей
Эти полезные и питательные ужины можно чередовать.
Время ужина нужно отрегулировать, приблизив его к восемнадцати часам. Если вы привыкли ужинать в 23:00, вам сразу не удастся не есть после шести. Можно постепенно стремиться к более раннему ужину, плавно перенося его время, например, каждый день на 10-15 минут раньше. Зачем нужен ранний ужин? Так мы даем себе возможность худеть во сне. Переносить ужин раньше, чем шесть вечера, не рекомендуется. К моменту отхода ко сну вы можете сильно проголодаться. Ложиться нужно стараться до 23:00. Даже при небольших диетических ограничениях вам потребуется больше отдыха. Хороший сон не менее 8 часов сделает похудение более комфортным и результативным.
Екатерина Мириманова советует выбирать для готовки именно пропаренный рис. По вкусу вы не отличите его от обычного, но он гораздо больше подходит для похудения.
Любители хлеба могут порадоваться. Белый хлеб допустим на завтрак в количестве нескольких кусочков, а также может быть добавлен в блюда, если это предполагают рецепты. Старайтесь постепенно переводить хлеб в разряд лакомств, прислушайтесь к себе, может быть, сегодня вам будет достаточно маленького кусочка хлеба, а завтра вы сможете без труда от него отказаться. Но оставить за собой право съесть немного хлеба утром, если вам этого захочется.
Обеды и завтраки нельзя пропускать ни в один из дней диеты, так как увеличивается риск переесть за ужином. Картошку или макароны можно приготовить и на обед, но кушать их с овощами, без мясной подливы. Каждый день такой обед делать не рекомендуется. Сделайте себе два вкусных дня: во вторник картошка, в четверг на обед спагетти. Если во время завтрака вы можете есть вермишель с мясом и сыром, то на обед это может быть просто вермишель с овощами. Обязательным элементом обедов должна быть белковая пища — мясо, яйца, рыба, морепродукты.
Чем ближе к вечеру, тем тщательнее приходится выбирать блюда и продукты. И все же у вас не будет чувства постоянных ограничений. Наступит утро, и вы сможете насладиться любыми продуктами, о которых мечтаете сейчас. Соблюдая разумные размеры порции, насыпая еду в маленькие тарелки, вы приучаете организм к получению удовольствия от самого продукта, а не от его количества, переполняющего желудок.
Примерное меню одного дня на диете Миримановой выглядит так.
- На завтрак — яичница с помидорами и кусочком хлеба, кофе и любимая сладость, кроме молочного шоколада.
- На обед приготовьте овощное рагу, ржаной хлеб, суши и зеленый чай.
- На ужин – тушеные морепродукты и чай.
По желанию можно сделать два дополнительных перекуса: второй завтрак и полдник. Ешьте йогурт и фрукты, отварное яйцо или перекусывайте свежими овощами, так вы не будете чувствовать голода.
Питьевой режим диетыПитьевой режим в этой диете немного отличается от общепринятых диетических стандартов. Пить ровно столько, сколько вам хочется – это правило Катерины Миримановой. Питье трех литров воды далеко не всегда ускоряет похудение, чаще оказывая обратное действие. У людей с лишним весом нередко наблюдается задержка жидкости. Если вы держите бутылку с водой на виду, то пьете достаточно, считает автор методики. Жажду на диете испытывать также вредно.
Кофе, чай и другие напитки на диете разрешены, но нужно стремиться к постепенному уменьшению сахара в напитках и отказу от сладкой газировки. Кстати, на диете Миримановой можно спиртное, но только сухое красное вино. Как правило, мы не так часто пьем спиртное, вечеринки у нас не каждый день. Но, отправляясь в гости, можно взять с собой бутылку этого вина и с удовольствием выпить полбокала. То же касается и семейных торжеств.
Точный оригинал диеты соблюдать не требуется, приятно, что ее можно адаптировать к собственным потребностям. Вы сами можете составить подробное меню на неделю, состоящее из ваших любимых блюд, которые полностью устраивают вас, как на вкус так и по соображениям бюджета. Чередуя хорошие полезные блюда и разбавляя их по утрам сладостями или жареной едой, вы постепенно худеете без стресса и формируете свою собственную диету, которой всегда легко придерживаться. Возможно, вам и не нужны такие результаты, которых достигла Мириманова, 60 кг вам сбрасывать не требуется. Но опыт Кати Миримановой показывает, что эта доступная каждому система помогает достигнуть желаемого веса и поддерживать его всегда.
Кроме советов по питанию, автор диеты рекомендует пересмотреть режим активности. Блог Миримановой содержит подробное описание системы, плюс материалы с рецептами в таблице, которые можно распечатать. Загрузите на смартфон шагомер, старайтесь проходить лишнюю остановку пешком. Заводите таймер на 10 минут и просто танцуйте под музыку в свое удовольствие. Отводите полчаса на время для себя – успевайте сделать процедуры красоты, приготовить красивую одежду на завтра. Если вы начнете заботиться о себе уже сейчас, процесс похудения будет идти гораздо более успешно!
Смотри видео, в котором мы задали самые странные вопросы диетологу:
Еще редакция Сlutch cоветует прочитать:
Красивая кожа зимой: ТОП-8 средств для ухода за кожей и волосами в холодное время года
«Как комарик укусил» – почему мы боимся боли и как этого избежать?
Оригинальный подарок для семьи
Удивление гарантировано: ТОП необычных подарков для всей семьи на Новый год 2022
Правда о «детских болезнях» от педиатра: Краснуха, ветрянка, дифтерия, коклюш — симптомы и опасность
«Система 60»: отзывы. Диета Екатерины Миримановой
Хотите похудеть? Более 90% женщин во всем мире дадут утвердительный ответ на этот вопрос, ведь какой бы ни был вес дамы или размер одежды, она всегда считает себя излишне толстой. Кажется, почти все думают, что скинуть один-два килограмма было бы неплохо. Эта мысль становится особенно навязчивой после посещения магазина женской одежды, когда понравившийся наряд не подходил, а огромное зеркало в гардеробной показывало все минусы собственной фигуры.
Могу или не могу
Мало кто верит, что килограммы, давно привыкшие к телу, смогут покинуть его безвозвратно. Действительно, когда много лет носишь большие вещи, сложно поверить, что есть шанс измениться. Многие женщины убеждены, что стройность – это врожденная черта, и им просто не повезло, ведь мама с бабушкой были «в теле», откуда у них осиная талия. А рассказы о широких костях и неудачной конституции тела в нашей стране не редкость.Отличным доказательством того, что эти убеждения не более чем миф, является «Система 60». Екатерине Миримановой, ее автору, удалось похудеть наполовину всего за полтора года. При этом она не вводила в свой рацион строгих ограничений, не изнуряла себя физическими нагрузками и не отказывалась от привычного образа жизни. Она успешно делится своим успешным опытом со всеми женщинами.
Немного об авторе методики
Как уже было сказано выше, своим появлением система питания «Минус60» обязана Екатерине Миримановой.Автор методики не является профессионалом в спорте, врачом или диетологом. Она женщина, мало чем отличающаяся от миллионов наших соотечественников.
И ей, как и многим, не повезло — все съеденные продукты не оставили тела бесследно, но оставили на фигуре неизгладимый след. Екатерина говорит, что, сколько себя помнит, всегда была полненькой. После рождения ребенка, в связи с гормональной перестройкой организма и изменившимся образом жизни, килограммы стали прибывать с удвоенной скоростью.В итоге стрелки остановились на отметке 120 кг. В этот момент Мириманова поняла, что край пропасти уже близок и нужно срочно что-то менять в себе и своей жизни. Она начала неустанно пробовать один метод похудения за другим и через 18 месяцев экспериментов добилась ожидаемого результата – сбросила 60 килограммов. Избавление от половины собственного веса — это гораздо больше, чем решительный поступок, не так ли? Весь свой положительный опыт она объединила в набор рекомендаций, который теперь называется «Система 60».Отзывы фолловеров говорят о методе Мириманова как о легком, простом и, главное, эффективном способе изменить себя.
Любимая система
Система питания «Минус 60» стала любимым способом избавления от излишков собственного тела для многих женщин. В чем секрет успеха? Главное – «Система 60» отличается от многих диет отсутствием строгих правил, жестких ограничений и радикальных запретов. Удивительно, но по рекомендации Миримановой разрешено абсолютно все.Более того, Екатерина не советует исключать из рациона любимые продукты, даже если они совсем не диетические. Единственное — нельзя молочный шоколад.
Благодарные подписчики системы оставляют множество отзывов на сайте Екатерины, а также в профильных блогах и форумах. Все без исключения рассказывают о своем положительном опыте похудения и прикрепляют соответствующие фото (до и после). Каждый отзыв наполнен радостью от произошедших с фигурой метаморфоз.
Последователи метода часто пишут и рассказывают о прекрасной психологической поддержке, которую оказывают книги и публикации Миримановой. Многим это помогло не только похудеть, но и избавиться от вредных привычек, даже устроить личную жизнь.
Без резких движений
«Система 60» основана на понимании того, что резкий отказ от привычного образа жизни, ограничения в питании и тяжелые физические нагрузки неизменно ведут к упадку сил. А он, в свою очередь, сведет на нет все предыдущие усилия.Худеть нужно медленно и осторожно.
Основные рекомендации
«Система 60» Мириманова очень лояльна ко всем. Можно все! Многие спросят: почему же тогда уходит вес? Секрет диеты заключается в соблюдении следующих пунктов:
- Правильная психологическая подготовка: не нужно откладывать начало новой жизни на потом. Если вы любите себя и хотите измениться к лучшему, вам нужно начинать решительные действия уже сейчас.
- Не нужно радикальных изменений — «Система 60» призвана перестроить все привычки в сторону здорового образа жизни и правильного питания.Усваивать новое нужно постепенно: уменьшать количество съедаемой за один раз пищи, заменять очень калорийные продукты на более легкие, но от этого не менее вкусные.
- У каждого свое время. Конечно, все возможно, но только в строго определенные часы.
Все достаточно просто, но каждый пункт требует подробного обсуждения.
Питание: правила приема
Главное в методике не то, что вы едите, а когда именно вы это делаете.«Система 60» позволяет есть любую пищу до полудня. Но с 12.00 вступают в силу следующие ограничения:
- Начиная с обеденного времени запрещается есть любые продукты, обжаренные на масле. Но можно есть пищу, приготовленную на гриле.
- В блюда, употребляемые до двух часов дня, можно добавлять сметану и майонез.
- Тем не менее, сочетать продукты стоит с осторожностью. Например, к мясу, птице или рыбе в качестве гарнира идеально подойдет салат, а «тяжелый» картофель и макароны лучше есть с овощами.
- Последний прием пищи должен быть в шесть часов вечера, это правило необходимо строго соблюдать. Пропускать ужин или переносить его на более раннее время не рекомендуется. В это время можно есть только мясо, либо каши с овощами, либо молочные продукты (творог, йогурт). На ужин категорически запрещены картофель, горох, грибы, баклажаны, тыква.
Вот и все правила. Как видите, страшных запретов нет. А если к вечеру очень захотелось торта, то остается только дождаться утра.
Что нельзя есть
Конечно по системе Мириманова, кроме молочного шоколада. То есть и сладкое, и жареное, и копченое. А если нужно избавиться от многого, то все же стоит ограничиться скудным рационом. Рекомендуется придерживаться принципов раздельного питания и не сочетать белки с углеводами. Количество последних вообще должно быть сведено к минимуму. Однако все ограничения должны быть сделаны очень тщательно. Главное не доводить себя до психологического голодания и провала.
Советы подписчикам
Екатерина Мириманова написала более 20 книг, в которых подробно описана система «Минус 60» (меню для правильного питания, даны советы подписчикам).
Автор метода неустанно повторяет следующие тезисы.
- Завтрак очень важен. Он запускает обмен веществ в организме, дает энергию и позволяет уменьшить количество порций во второй половине дня.
- Можно пить любые напитки. Разрешается сладкий чай и кофе, но все же необходимо постепенно уменьшать количество сахара, заменяя его фруктозой или более полезным коричневым сахаром.В качестве напитка лучше всего выбирать сухое вино.
- Для сладкоежек позавтракать одно удовольствие. Система «Минус 60» позволяет практически никогда ни от чего не отказываться до 12.00. Есть только один запрет: молочный шоколад. Его обязательно нужно заменить черным, но в этом случае следует быть осторожным.
- Белый хлеб, картофель и макароны разрешены только утром. В идеале никогда не следует сочетать их с белковыми продуктами.
- Ужин «Система 60» рекомендует планировать на 18:00 и ни минутой позже.Конечно, для тех, кто ложится спать в 2-3 часа ночи, а просыпается в 11 утра, график можно сдвинуть.
- Пейте по мере необходимости. «Система 60» не вводит определенное количество воды, которое необходимо впитать в течение дня.
- Ужин должен быть максимально низкокалорийным и легкоусвояемым.
Спорт – основа здорового образа жизни
Методика Миримановой говорит о необходимости ежедневных физических упражнений. И делать это нужно каждый день, тогда полезные упражнения станут хорошей привычкой, придадут бодрость всему телу и энергию мышцам.
Екатерина Мириманова даже разработала собственный небольшой комплекс упражнений. Все они очень просты и подойдут даже людям с избыточным весом. К ним относятся лапки с ножками, всем известное как «Кошечка», подъемы туловища и ножки, прыжки. Комплекс составлен так, чтобы за короткое время нагрузка давалась на все группы мышц. По словам Екатерины, стоит хоть немного начать заниматься, и результат появится. Через две недели подтянутся бедра и живот, а еще через месяц отражение в зеркале принесет массу радости.Автор методики рекомендует сделать собственное фото в полный рост в самом начале пути «похудения». Это послужит неизменной и самой надежной мотивацией.
Начинать использовать рекомендованную методику с ограничения в еде, и только потом переходить к физическим нагрузкам.
Похудение и кожа
Тот, кто хоть раз сбросил больше одного кг, прекрасно знает, что растянутая кожа никуда не денется. Тело хоть и становится стройным, но его поверхность полностью лишена упругости.А теперь представьте, что происходит с кожей тех, кто избавляется от 20-30 килограммов (именно такой вес позволяет сбросить «Систему 60»). Отзывы на эту тему очень неутешительные.
Однако у автора методики припасено несколько полезных советов:
- Для придания тонуса коже очень важен ежедневный массаж.
- Разглаживает поверхность кожи и уменьшает жировой слой при регулярном скрабировании натуральным молотым кофе. А таблетки для кофемашин или заварные чащи не принесут должного эффекта.
- Смешайте всего одну таблетку мумие с любым лосьоном, и эффект вас удивит. Средство ускоряет регенерацию кожи и способствует практически полному исчезновению растяжек.
- Тем, кто хочет значительно снизить вес, важно тщательно следить за кожей лица и шеи, рекомендуется купить качественный питательный крем для старшей возрастной категории.
- Физический стресс может помочь тонизировать мышцы и подтянуть кожу.
Моральные аспекты
Правильно питаться и развиваться физически очень важно на пути к идеальному весу.Но для большинства женщин главная психологическая составляющая. Автор метода на собственном примере убедилась, как тяжело быть полнее своих подружек, покупать не ту одежду, которая нравится, а ту, которая подходит по размеру. Очень сложно поверить в себя, начать и не свернуть с намеченного пути, а потом привыкнуть к своей новой фигуре. Поэтому, когда Екатерина Мириманова добилась столь ошеломляющего результата, она посчитала своим долгом поделиться положительным опытом с другими женщинами. Автор создала свою страницу в Интернете и написала много книг.В них описывается, что представляет собой «Система 60», отзывы уже состоявшихся фолловеров, советы для тех, кто только начал худеть. Кстати, среди книг есть и художественные: «Призрак и я», «Лица». И издан ряд кулинарных сборников, в которых рецепты лучшие для последователей метода.
«Система 60» — это не просто диета. Это призыв к действию, возможность начать здоровый образ жизни и оставить свои ошибки в прошлом. Главное, к чему призывает Екатерина Мириманова – начать сегодня, не винить себя за набранный вес, не требовать невозможного и никуда не торопиться.Безусловно, мотивация никому не повредит, но не надо искать внешних раздражителей, нужно меняться исключительно для себя.
Тем, кто боится перемен, нет надежной поддержки в ближайшем окружении, автор метода всегда поможет лично. Для большей эффективности даже была создана целая система онлайн-обучения. Ведь именно ради этого общения с другими женщинами Екатерина Мириманова и начала свою общественную деятельность.
Что психология говорит о материализме и праздниках
Были бы праздники такими же без примеси материализма? Что значит быть материалистом в современном обществе потребления и обязательно ли это плохо? Психологи провели исследование, которое помогло ответить на эти и многие другие вопросы.
Тим Кассер, доктор философии , профессор психологии Нокс-колледжа в Гейлсберге, штат Иллинойс, специализирующийся на материализме и благополучии. Среди многочисленных статей и книг Кассера — «Высокая цена материализма», опубликованная в 2002 году, и «Психология и культура потребления» в 2004 году. Кандидат психологических наук Университета Рочестера.
APA недавно задала Кассеру следующие вопросы:
АПА: Что значит быть материалистом и почему его обычно рассматривают в негативном свете? Почему одни люди материалистичны, а другие нет?
Кассер: Быть материалистом означает иметь ценности, которые отдают относительно высокий приоритет зарабатыванию больших денег и обладанию большим имуществом, а также имиджу и популярности, которые почти всегда выражаются через деньги и имущество.
Я думаю, что материализм рассматривается в негативном свете, потому что у людей может быть неприятный опыт общения с материалистичными людьми. Из исследований мы знаем, что материализм, как правило, связан с более конкурентным, манипулятивным и эгоистичным отношением к другим, а также с меньшей эмпатией. Такое поведение обычно не одобряется средним человеком, хотя оно поощряется некоторыми аспектами нашей капиталистической экономической системы.
Исследования выявили два набора факторов, которые приводят людей к материалистическим ценностям.Во-первых, люди становятся более материалистичными, когда они получают сообщения о том, что такие занятия важны, будь то через их родителей и друзей, общество или средства массовой информации. Во-вторых, и несколько менее очевидно: люди более материалистичны, когда чувствуют себя неуверенно или им угрожает опасность, будь то из-за отказа, экономических страхов или мыслей о собственной смерти.
APA: Как средства массовой информации, особенно социальные сети, повлияли на материализм в современном мире?
Kasser: Исследования показывают, что чем больше люди смотрят телевизор, тем более материалистичными становятся их ценности. Вероятно, это потому, что и шоу, и реклама посылают сообщения о том, что счастливые, успешные люди богаты, имеют хорошие вещи, красивы и популярны. Следует помнить, что, по крайней мере в США, подавляющее большинство средств массовой информации принадлежит нескольким коммерческим корпорациям, которые зарабатывают деньги на продаже рекламы, а цель рекламы — продавать товары.
Исследование, которое я недавно опубликовал вместе с психологом Джин Твенге, отслеживало, как материализм изменился в США.С. старшеклассников в течение нескольких десятилетий и связал эти изменения с расходами на рекламу в стране. Мы обнаружили, что степень, в которой класс старшеклассников данного года заботился о материалистических занятиях, можно было предсказать на основе того, какая часть экономики США приходилась на расходы на рекламу и маркетинг — чем больше реклама доминировала в экономике, тем более материалистичной была молодежь. мы.
Одно исследование американской и арабской молодежи показало, что материализм выше по мере увеличения использования социальных сетей. Полученные данные показывают, что, как использование телевидения связано с большим материализмом, так и использование социальных сетей. Это имеет смысл, так как большинство сообщений в социальных сетях также содержат рекламу, благодаря которой компании, работающие в социальных сетях, получают прибыль.
APA: В чем разница между крайним материализмом и навязчивым покупателем? Может ли материалистичный человек стать навязчивым покупателем?
Кассер: Материализм касается ценностей и стремления к деньгам, имуществу и тому подобному.Компульсивное потребление — это когда человек чувствует себя неспособным контролировать желание потреблять, часто потому, что он или она пытается заполнить какую-то пустоту или преодолеть тревогу. Материализм и компульсивное потребление связаны друг с другом. В недавнем метаанализе связи между материализмом и благополучием людей мы обнаружили, что корреляция между материализмом людей и тем, насколько они сообщают о проблемах с компульсивным потреблением, была сильной и последовательной во многих исследованиях.
Хотя материализм является фактором риска компульсивного потребления, это не одно и то же.Другой психолог, Мириам Татцель, предполагает, что некоторые материалисты «расходятся» со своими деньгами, а некоторые — «туго». Оба типа людей заботятся о деньгах и имуществе, но распущенный материалист будет тратить, тратить и тратить, тогда как скупой материалист будет больше похож на Скруджа или Сайласа Марнера, пытающихся накопить богатство.
APA: Какие могут быть положительные стороны материализма?
Кассер: Из литературы мы знаем, что материализм связан с более низким уровнем благополучия, менее просоциальным межличностным поведением, более экологически разрушительным поведением и худшими академическими результатами.Это также связано с большим количеством проблем с расходами и долгами. С моей точки зрения, все это негативные последствия.
Но с точки зрения экономической/социальной системы, которая опирается на расходы для обеспечения высокого уровня прибыли для компаний, экономического роста нации и налоговых поступлений для правительства, потребление и чрезмерные расходы, связанные с материализмом, могут рассматриваться как положительный.
APA: Что говорят психологические исследования о связи материализма со счастьем?
Kasser: Связь между материализмом и благополучием является самым давним направлением исследований в литературе по материализму.Мои коллеги из Университета Сассекса и я недавно опубликовали метаанализ, который показал, что отрицательная связь между материализмом и благополучием сохраняется во всех видах мер материализма, типах людей и культурах. Мы обнаружили, что чем более высоко люди придерживались материалистических ценностей, тем больше они испытывали неприятных эмоций, депрессии и беспокойства, тем больше они сообщали о проблемах со здоровьем, таких как боли в животе и головные боли, и тем меньше они испытывали приятных эмоций и были удовлетворены своей жизнью.
Наиболее распространенное объяснение того, почему благосостояние ниже, когда материализм высок, касается психологических потребностей. В частности, материалистические ценности связаны с образом жизни, который относительно плохо справляется с удовлетворением психологических потребностей, чтобы чувствовать себя свободным, компетентным и связанным с другими людьми. Когда люди не удовлетворяют свои потребности в полной мере, они сообщают о более низком уровне благополучия и счастья, а также о большем страдании.
APA: Как религиозная вера влияет на материализм, особенно во время праздников?
Kasser: Пара исследований показала, что негативная связь между материализмом и благополучием еще сильнее проявляется у религиозных людей.Вероятно, это происходит из-за конфликта между материалистическими и религиозными устремлениями. То есть исследования того, как устроены ценности людей, показали, что одни цели легко преследовать одновременно, а другие находятся в напряжении или конфликтуют друг с другом. Например, относительно легко сосредоточиться на целях, связанных с деньгами, и в то же время сосредоточиться на целях, связанных с имиджем и популярностью, поскольку все эти цели связаны и способствуют друг другу. Исследование показывает, что существует противоречие между материалистическими целями и религиозными устремлениями, как это уже давно предполагали Иисус, Мухаммед, Будда, Лао-Цзы и многие другие религиозные мыслители. Кажется, что попытки преследовать материальные и духовные цели вызывают у людей конфликты и стресс, что, в свою очередь, снижает их благополучие.
Одно исследование показало, что это происходит и во время Рождества. Мы с психологом Кеном Шелдоном совместно провели исследование, которое показало, что чем больше люди сосредотачивают свой праздничный сезон на материалистических целях, таких как расходы и получение, тем меньше они сосредотачиваются на духовных целях. Мы также обнаружили, что люди сообщали о «более веселом» Рождестве, когда духовность была значительной частью их праздника, но сообщали о более низком самочувствии в связи с тем, что в празднике преобладали материальные аспекты.
С Kasser можно связаться по электронной почте или по телефону (309) 341-7283.
Американская психологическая ассоциация в Вашингтоне, округ Колумбия, является крупнейшей научной и профессиональной организацией, представляющей психологию в Соединенных Штатах. В состав АРА входят около 130 000 исследователей, преподавателей, клиницистов, консультантов и студентов. Благодаря своим подразделениям в 54 областях психологии и связям с 60 ассоциациями штатов, территорий и провинций Канады АПА работает над созданием, распространением и применением психологических знаний на благо общества и улучшения жизни людей.
Правила безопасности на рабочем месте в условиях COVID-19, штат Вирджиния, вступили в силу
Quick Hit
Как мы сообщали ранее, Вирджиния стала первым штатом, который издал обязательные правила безопасности на рабочем месте в связи с COVID-19, когда 15 июля 2020 года Совет по нормам безопасности и охране здоровья штата Вирджиния (VSHCB) утвердил временный стандарт для чрезвычайных ситуаций. Окончательный текст опубликован. выпущен, и новые правила, которые применяются к большинству частных работодателей, вступили в силу 27 июля 2020 года.Работодатели, которые не соблюдают требования, могут быть оштрафованы на сумму до 13 494 долларов США за «серьезное» нарушение и до 134 937 долларов США за «повторное» или «умышленное» нарушение.
Ключевые выводы
Новые правилаВирджинии достаточно подробны. Новые обязательные правила на рабочем месте будут: запрещать рабочим или другим лицам с подозрением на коронавирус приходить на рабочее место; требовать от работодателей соблюдения определенных типов протоколов при разрешении выздоровевшим работникам вернуться на рабочее место; и обязать использовать средства индивидуальной защиты («СИЗ»), дезинфекцию и санитарию, социальное дистанцирование, обучение сотрудников и планы реагирования на инфекционные заболевания при определенных обстоятельствах.На рабочих местах, которые считаются подверженными «низкому» риску, сотрудники должны будут носить тканевые покрытия для лица, когда они не могут соблюдать дистанцию в шесть футов, а также на рабочих местах, которые считаются «очень высокими», «высокими» или « подверженность среднему риску будет иметь дополнительные требования к рабочему месту.
Подробнее
В среду, 15 июля 2020 г. , VSHCB принял § 16 VAC 25-220, Временный чрезвычайный стандарт по профилактике инфекционных заболеваний: вирус SARS-CoV-2, вызывающий COVID-19 («ETS»).
Дата вступления в силу
ETS вступил в силу немедленно 27 июля 2020 года, когда он был опубликован в газете Ричмонда в соответствии с законодательством Вирджинии. Однако, согласно пресс-релизу Министерства труда и промышленности штата Вирджиния, требование о наличии на определенных рабочих местах письменного плана готовности к инфекционным заболеваниям и ответных действий, а также связанный с такими планами компонент обучения вступит в силу через шестьдесят (60) дней после даты вступления в силу ETS. , 25 сентября 2020 г., а все другие требования к обучению вступят в силу через тридцать (30) дней после даты вступления в силу ETS, 26 августа 2020 г.
Временный стандарт будет действовать в течение шести месяцев, а затем автоматически истечет, если он не будет заменен постоянным регламентом.
Затронутые работодатели
ETS будет применяться к работодателям в Содружестве Вирджиния, которые подпадают под юрисдикцию штата Вирджиния по безопасности и гигиене труда («VOSH»), как описано в §§ 16VAC25-60-20 и 16VAC25-60-30, включая большинство частных работодателей в Вирджинии. , а также всех государственных и местных служащих.Тем не менее, частные и государственные высшие учебные заведения считаются соблюдающими требования, если у них есть планы повторного открытия, сертифицированные Государственным советом по высшему образованию в Вирджинии, и они действуют в соответствии с этими планами, если эти планы обеспечивают эквивалентные или более высокие уровни. защиты сотрудников, чем положение ETS.
Временные стандартные требования к чрезвычайным ситуациям
A. Взаимодействие с рекомендациями CDC
Работодатели, которые соблюдают рекомендации, содержащиеся в руководствах Центра контроля заболеваний («CDC») по снижению риска заражения COVID-19 на рабочем месте, которые обеспечивают эквивалентную или большую защиту, чем предусмотрено положением ETS, будут считаться соблюдающими со стандартом.И соблюдение таких рекомендаций, обязательных или необязательных, будет считаться доказательством добросовестности в любом исполнительном производстве, связанном с ETS.
B. Требования различаются в зависимости от уровня подверженности риску
Требования ETS различаются в зависимости от того, подпадает ли опасность или рабочая задача под определение стандарта «очень высокий», «высокий», «средний» или «низкий» уровень риска воздействия. Определение уровней риска воздействия включает рассмотрение выполняемых рабочих задач, рабочей среды (т.g., в помещении или на открытом воздухе), способность практиковать физическое дистанцирование, типы передачи инфекции, с которыми можно столкнуться, такие как потенциальная передача воздушно-капельным путем или контакт с зараженными поверхностями, а также присутствие человека, о котором известно или подозревается, что он инфицирован вирус SARS-CoV-2, вирус, вызывающий COVID-19.
C. Обязательные требования для всех работодателей
Независимо от уровня риска воздействия — «очень высокий», «высокий», «средний» или «низкий» риск воздействия — ETS предъявляет ряд обязательных требований для всех работодателей Вирджинии. Работодатели обязаны:
- Провести оценку риска опасностей и рабочих задач, которые потенциально могут подвергнуть сотрудников риску заражения COVID-19, и классифицировать каждую рабочую задачу в соответствии со стандартом «очень высокий», «высокий», «средний» или «низкий» риск воздействия. .
- Предоставьте сотрудникам «легкий и частый доступ и разрешение на использование мыла и воды, а также дезинфицирующего средства для рук, где это возможно, на время работы».
- Обеспечьте гибкие правила отпуска по болезни в соответствии с рекомендациями общественного здравоохранения «в той мере, в какой это возможно и разрешено законом, включая, помимо прочего, Закон о реагировании на коронавирус для семей в первую очередь».
- Поощряйте сотрудников «самоконтролировать признаки и симптомы COVID-19» и «информировать сотрудников о методах» самоконтроля.
- «Разработайте и внедрите политики и процедуры для сотрудников, чтобы сообщать, когда они испытывают симптомы, соответствующие COVID-19, и не было поставлено альтернативного диагноза».
- Не разрешать сотрудникам или другим лицам, о которых известно или подозревается, что они заражены вирусом, «являться или оставаться на рабочем месте или выполнять работу у клиента или клиента до тех пор, пока не будет получено разрешение на возвращение к работе», как указано в ETS.Работники, о которых известно или подозревается наличие вируса, могут по-прежнему заниматься удаленной работой или другими формами изоляции на рабочем месте.
- Сообщите субподрядчикам и компаниям, которые предоставляют контрактных или временных сотрудников, о «важности того, чтобы сотрудники или другие лица», о которых известно или подозревается наличие вируса, оставались дома.
- «Насколько это разрешено законом, включая HIPAA, создать систему для получения отчетов», чтобы отслеживать и сообщать, когда сотрудники, субподрядчики, контрактники и временные сотрудники дали положительный результат на COVID-19 и присутствовали на рабочем месте в течение предыдущего 14 дней положительный тест. Работодатели должны уведомить:
- «Собственные сотрудники, которые могли подвергнуться воздействию, в течение 24 часов после того, как стало известно об их возможном воздействии», при сохранении конфиденциальности личности лица, давшего положительный результат теста, в соответствии с федеральными законами и законами штата Вирджиния. Работодатели должны направить аналогичные уведомления другим работодателям, чьи сотрудники присутствовали на рабочем месте и могли подвергнуться воздействию в течение этого периода времени, а также владельцу здания/объекта.
- Департамент здравоохранения Вирджинии в течение 24 часов после обнаружения положительного случая; и
- Министерство труда и промышленности Вирджинии «в течение 24 часов после обнаружения трех (3) или более сотрудников, присутствующих на рабочем месте в течение 14-дневного периода, с положительным результатом на [COVID-19] в течение этого 14-дневного периода времени. .
- «Ничто в стандарте не должно толковаться как требующее от работодателей отслеживать контакты».
- Разработайте и внедрите политики и процедуры для возвращения сотрудников на работу после того, как у них станет известно или подозревается, что они переболели COVID-19. Стандарт требует, чтобы работодатели использовали стратегию, основанную на симптомах или тестах, при принятии решения о возвращении на работу. Работодатели не могут использовать тестирование на антитела или серологическое тестирование для принятия решения о возвращении на работу.
- В соответствии со стратегией, основанной на симптомах, сотруднику не будет разрешено вернуться на работу, пока не пройдет 10 дней с момента появления симптомов и не пройдет 3 дня (72 часа) с момента выздоровления (т.г. устранение лихорадки без использования жаропонижающих препаратов и улучшение респираторных симптомов, таких как кашель или одышка).
- В соответствии со стратегией, основанной на тестировании, сотруднику не разрешается возвращаться на работу до тех пор, пока температура не снизится без применения жаропонижающих препаратов, улучшение респираторных симптомов и не менее двух отрицательных результатов теста на COVID-19, соответствующих определенным стандартам. .
- Кроме того, в стандарте указано, что тестирование на COVID-19 считается «медицинским обследованием» в соответствии с § 40 Кодекса штата Вирджиния.1-28, и, таким образом, работник не может быть обязан оплатить стоимость теста для определения возвращения к работе.
- Разработайте политики и процедуры для возвращения к работе бессимптомных сотрудников либо с помощью стратегии, основанной на времени, либо на основе тестирования.
- В соответствии со стратегией, основанной на времени, сотрудник с положительным результатом теста на COVID-19, но без симптомов, не будет допущен к работе, пока не пройдет не менее 10 дней с даты его первого положительного диагностического теста на COVID-19.
- В соответствии со стратегией, основанной на тестах, сотрудник с положительным результатом теста на COVID-19, но не имеющий симптомов, не будет допущен к работе до тех пор, пока у него не будет не менее двух отрицательных результатов теста на COVID-19, соответствующих определенным стандартам.
- «Обеспечить соблюдение сотрудниками физического дистанцирования на работе и во время оплачиваемых перерывов на территории работодателя», в том числе с помощью объявлений, вывесок, визуальных подсказок, а также ошеломления или ограничения доступа в определенные зоны.
- Контролируйте, реконфигурируйте и/или альтернативный доступ и использование мест общего пользования, комнат отдыха и обеденных залов, чтобы обеспечить физическое дистанцирование. «Если характер работы или рабочей зоны работодателя не позволяет сотрудникам принимать пищу на рабочем месте сотрудника при соблюдении физического дистанцирования», работодатель должен четко опубликовать ограничения на вместимость, требования к физическому дистанцированию и правила мытья/дезинфекции рук и дезинфекции поверхностей. на въезде на территорию. Работодатели также должны «соблюдать лимит вместимости», предоставлять «средства для мытья рук и дезинфицирующие средства для рук, где это возможно», для сотрудников и обеспечивать регулярные интервалы уборки или дезинфекции или требовать от сотрудников чистить и дезинфицировать зону, в которой они находились в непосредственной близости. до отъезда.
- Когда «характер работы работника или рабочей зоны не позволяет сотрудникам соблюдать требования физического дистанцирования» или «когда технические решения, методы работы и административный контроль невозможны или не обеспечивают достаточную защиту», работодатели должны обеспечить средства индивидуальной защиты. оборудование («СИЗ») и обеспечить соблюдение стандартов защиты органов дыхания и СИЗ, «применимых к его отрасли» и «в соответствии с законами, стандартами и правилами VOSH».
- ETS также включает требования, касающиеся санитарии и дезинфекции, в том числе требования по очистке и дезинфекции зон, где люди, о которых известно или с подозрением на наличие COVID-19, имели доступ или работали, очистке и дезинфекции поверхностей и дверей, к которым часто прикасаются, в конце каждой смены, предоставления сотрудникам которые взаимодействуют с широкой публикой, клиентами или подрядчиками с расходными материалами для немедленной очистки и дезинфекции поверхностей, с которыми контактируют во время взаимодействия, и обеспечивают использование только дезинфицирующих химикатов и продуктов, одобренных EPA для использования против COVID-19.
D. Повышенные требования к рабочим местам со средним, высоким и очень высоким уровнем риска
ETS дополнительно включает повышенные требования к рабочим местам с опасностями или рабочим заданиям, классифицируемым как «средний» риск воздействия. Такие требования включают в себя технические средства контроля, такие как надлежащее техническое обслуживание и соответствие требованиям систем кондиционирования воздуха, а также административные и рабочие методы контроля «насколько это возможно», такие как требование предварительной проверки симптомов перед рабочей сменой, внедрение удаленной работы и / или политики поэтапной смены, и установка физических барьеров, чтобы помочь смягчить распространение COVID-19.В часто задаваемых вопросах, опубликованных 27 июля 2020 г., поясняется, что ETS не требует, чтобы эти работодатели устанавливали системы кондиционирования воздуха, поскольку требование «конкретно применяется к« системам кондиционирования воздуха, где они установлены ». ETS дополнительно указывает, что работодатели должны оценить рабочее место, чтобы определить, Опасности COVID-19 или рабочие задачи присутствуют или могут присутствовать, что требует использования СИЗ. Если такие опасности существуют, работодатели должны выбрать и предоставить соответствующие СИЗ пострадавшим работникам. Работодатели также должны письменно подтвердить, что была проведена необходимая оценка опасности на рабочем месте для определения соответствующих СИЗ.
Дополнительные требования устанавливаются для опасностей или рабочих задач, классифицируемых как «очень высокий» или «высокий» риск воздействия, включая установку соответствующих систем обработки воздуха, использование комнат для изоляции от инфекций, передающихся воздушно-капельным путем, «где это возможно и доступно», ограничение времени, в течение которого работники в контакте с пациентами, у которых известно или подозревается наличие COVID-19, предлагая усиленный медицинский контроль за сотрудниками во время вспышек COVID-19, а также предоставляя сотрудникам специальное образование и обучение по предотвращению передачи COVID-19. В ETS также говорится, что «насколько это возможно» работодатели должны обеспечить психологическую и поведенческую поддержку для преодоления стресса сотрудников бесплатно.
Работодатели с опасностями или рабочими заданиями, классифицированными как «средний» риск, с одиннадцатью (11) или более работниками, или те, с опасностями или рабочими заданиями, классифицированными как «высокий» или «очень высокий» риск, должны разработать и внедрить письменный план реагирования на инфекционные заболевания и обеспечения готовности («План»).Это требование вступит в силу через шестьдесят (60) дней после даты вступления в силу ETS, 25 сентября 2020 года. Работодатели, на которые распространяется действие Плана, должны назначить лицо, ответственное за реализацию Плана, и План должен предусматривать участие сотрудников в его разработке и реализации. . План должен учитывать и учитывать опасности, связанные с риском заражения COVID-19 на рабочем месте, индивидуальные факторы риска сотрудников, планы действий в чрезвычайных ситуациях, возникающие в связи со вспышками COVID-19, реализацию основных мер профилактики заражения, а также политику оперативного выявления и изоляции лица на рабочем месте, которые, как известно или подозреваются, инфицированы COVID-19. Кроме того, если работодатель соблюдает обязательные и необязательные рекомендации в любых руководствах CDC или руководящих документах Содружества Вирджинии вместо соблюдения положения ETS, в Плане должны быть указаны такие материалы.
Работодатели с опасностями или рабочими заданиями, классифицированными как «средний», «высокий» или «очень высокий» риск воздействия, должны проводить обучение всех сотрудников, работающих на рабочем месте, чтобы распознавать опасности вируса, а также признаки и симптомы заболевания COVID-19. а также обучить сотрудников процедурам, которым необходимо следовать, чтобы свести к минимуму эти опасности.Это требование вступит в силу через тридцать (30) дней после даты вступления в силу ETS, 26 августа 2020 года, и требуется для всех сотрудников на рабочем месте, независимо от конкретной классификации риска этого сотрудника. Обучение должно включать требования ETS, обязательные и необязательные рекомендации CDC, методы работы для минимизации рисков и опасностей, связанных с COVID-19, использование и ограничения СИЗ, антидискриминационные положения ETS и План работодателя, где это применимо. .Обучение по Плану работодателя должно быть проведено до 25 сентября 2020 г., шестьдесят (60) лет после даты вступления в силу ETS. Работодатели должны дополнительно проверять соблюдение этого стандарта, предлагая сотрудникам, подвергающимся опасностям со «средним», «высоким» или «очень высоким» риском воздействия, или рабочим заданиям подписывать письменное свидетельство, в котором указаны обученный сотрудник, подробности обучения и имя лица (лиц), подготовившего учебные материалы и проводившего обучение. Переподготовка должна быть обеспечена, когда у работодателя есть основания полагать, что работник не обладает пониманием или навыками, требуемыми в соответствии с ETS, когда изменения на рабочем месте делают предшествующее обучение устаревшим или когда в план работодателя вносятся изменения.
Вместо обучения работодатели с опасностями или рабочими заданиями, классифицируемыми как «более низкий» риск, могут предоставлять работникам письменную или устную информацию о требованиях ETS, характеристиках вируса, методах работы, направленных на минимизацию риска распространения вируса, и антидискриминационное положение ETS. VDLI предоставил информационный лист «Обучение по снижению риска», который можно использовать для соблюдения этого требования.
E. Защита информаторов n
ETS также включает запрет на «увольнение или любую дискриминацию в отношении сотрудника за осуществление прав в соответствии с положениями [ETS] о безопасности и гигиене труда» или в отношении сотрудника, который выражает «обоснованную озабоченность» о борьбе с инфекцией COVID-19 на рабочем месте работодателю, представителю работодателя, другим работникам, государственному учреждению или общественности через печатные, онлайновые, социальные или любые другие средства массовой информации.
Пояснительные материалы
Отдел совместных программ VOSH выпустил учебные и информационные материалы, в том числе «Девять шагов для достижения соответствия ETS COVID-19», документ о сертификации оценки рисков, PowerPoint о требованиях ETS, часто задаваемые вопросы о стандарте, шаблон плана обеспечения готовности к инфекционным заболеваниям и реагирования на них. для различных отраслей промышленности, включая специальные руководства для исследовательских лабораторий, розничных магазинов и офисов, а также информационный листок для обучения работодателей с опасностями или рабочими задачами, классифицируемыми как «низкий» риск.В пресс-релизе Министерства труда и промышленности Вирджинии от 27 июля также говорится, что департамент предлагает консультационные услуги на местах, чтобы помочь работодателям лучше понять и добровольно соблюдать стандарты VOSH.
Заключение
Вирджиния является первым штатом, который сделал обязательными правила безопасности на рабочем месте в отношении потенциального риска заражения COVID-19. Работодатели в Содружестве Вирджинии должны ознакомиться с этими новыми правилами и оценить, следует ли скорректировать политику, процедуры и физические условия на рабочем месте, чтобы они соответствовали требованиям и избегали риска штрафов.
* * *
Междисциплинарная группа реагирования на коронавирус Proskauer, работающая в разных юрисдикциях, сосредоточена на поддержке и решении проблем клиентов. Посетите наш Ресурсный центр по коронавирусу, чтобы получить рекомендации по мерам управления рисками, практические шаги, которые могут предпринять компании, и ресурсы, помогающие управлять текущими операциями.
Что такое джентрификация и смещение
Редлайнинг — это процесс, в ходе которого Корпорация займов домовладельцев (HOLC), федеральное агентство, присваивала районам рейтинги для направления инвестиций.Эта политика названа в честь практики классификации районов как красных или «опасных» на картах HOLC, что означает, что эти районы считались наиболее рискованными с точки зрения выдачи кредита. Эти районы были преимущественно домом для цветных сообществ, и это не случайно; «опасный» рейтинг был в значительной степени основан на расовой демографии. Другими словами, «красная черта» была явно дискриминационной политикой. Красная черта затруднила получение жителями кредитов на приобретение жилья или содержание жилья и привела к циклам отказа от инвестиций.
Эта история не осталась в прошлом: 87% районов Сан-Франциско, отмеченных красной чертой, — это районы с низким доходом, которые сегодня подвергаются джентрификации. Посмотрите видео, чтобы убедиться в этой связи, и узнайте больше о долговременных последствиях этой дискриминационной политики.
Прошлое укоренено в сегодняшнем опыте наших районов и городов; для будущего городов важно, чтобы мы противостояли этой истории.
Наследие красной черты в районе залива — Сан-Франциско, Ист-Бэй, Сан-Хосе
В приведенном выше видео показано совпадение между красной чертой, джентрификацией и исключением в Сан-Франциско, но эти тенденции распространены в районе залива.Взгляните на приведенные ниже GIF-файлы для быстрого обзора связей между красной чертой, джентрификацией и исключением в Сан-Франциско, Восточном заливе и Сан-Хосе.
Сан-Франциско – красная черта и джентрификация:
87% сегодняшних районов джентрификации в Сан-Франциско были оценены HOLC как «опасные» (красный) или «находящиеся в явном упадке» (желтый).
Сан-Франциско – красная черта и исключение:
45% сегодняшних запретных зон в Сан-Франциско были оценены HOLC как «лучшие» (зеленые) или «по-прежнему желательные» (синие).
Ист-Бэй – красная черта и джентрификация:
83% сегодняшних районов джентрификации в Восточном заливе были оценены HOLC как «опасные» (красный) или «определенно ухудшающиеся» (желтый).
Восточный залив – красная черта и исключение:
75% сегодняшних запретных районов в Восточном заливе были оценены HOLC как «лучшие» (зеленый) или «все еще желательные» (синий).
Сан-Хосе – красная черта и джентрификация:
87% современных районов джентрификации в Сан-Хосе были оценены HOLC как «опасные» (красный) или «определенно ухудшающиеся» (желтый).
Сан-Хосе – красная черта и исключение:
59% сегодняшних запретных зон в Сан-Хосе были оценены HOLC как «лучшие» (зеленые) или «все еще желательные» (синие).
Узнайте больше о красной черте в вашем сообществе и за его пределами:
Хотите знать, как ваш район был оценен HOLC?
Хотите понять связь между красными чертами на картах и другими данными в вашем сообществе?
- Набор данных оцифрованных карт Университета Ричмонда теперь находится на PolicyMap, так что пользователи могут накладывать эти полигональные данные на ряд других слоев для изучения тенденций в жилищной и экономической сегрегации, а также во множестве других областей.
- Недавнее исследование NCRC «Карты HOLC «красной черты»: устойчивая структура сегрегации и экономического неравенства» рассматривает постоянное влияние красной черты в городах США — на экономическую и расовую сегрегацию, неравенство и джентрификацию, а также изучение региональных различий.
- Новые карты от Wenfei Xu позволяют зрителю сравнить различные классификации районов, начиная с карт, отмеченных красной чертой, и с историческими данными переписи населения США, чтобы лучше понять влияние на социально-экономическое неравенство и сегрегацию.
- Недавнее разъясняющее видео NPR «Почему города до сих пор так разделены?» выявляет связи между красной чертой и ландшафтами возможностей в наших городах — в школах, здравоохранении, богатстве, полиции и многом другом.
- Красная черта Калифорнии в контексте: Узнайте о красной черте и ее последствиях в Окленде и Лос-Анджелесе.
Высокогорные районы — Специальный доклад об океане и криосфере в условиях меняющегося климата
Криосфера (включая снег, ледники, вечную мерзлоту, озерный и речной лед) является неотъемлемым элементом высокогорных регионов, в которых проживает примерно 10% населения мира. Широкомасштабные изменения криосферы влияют на физические, биологические и человеческие системы в горах и окружающих низменностях, причем последствия очевидны даже в океане. Основываясь на 5-м оценочном отчете МГЭИК (ДО5), в этой главе оцениваются новые данные о наблюдаемых недавних и прогнозируемых изменениях в горной криосфере, а также о связанных с ними воздействиях, рисках и мерах по адаптации, связанных с природными и антропогенными системами. Воздействия в ответ на изменения климата независимо от изменений в криосфере в этой главе не оцениваются.Полярные горы включены в главу 3, за исключением гор на Аляске и прилегающих территориях Юкона, Исландии и Скандинавии, которые включены в эту главу.
Наблюдения за изменениями криосферы, воздействиями и адаптацией в высокогорных районах
Наблюдения Показать Общее снижение по низкому снежному покрытию ( высокая доверия высокая доверия ), ледники ( очень высокая доверия очень высокая доверия , ) и вечная мерзлока ( изменение в последние десятилетия. Продолжительность снежного покрова сократилась почти во всех регионах, особенно в долинах, в среднем на 5 дней за десятилетие, с вероятным диапазоном от 0 до 10 дней за десятилетие. Глубина и площадь снежного покрова на низких высотах уменьшились, хотя межгодовые колебания велики. Массовое изменение ледников во всех горных районах (исключая Канадскую и Российскую Арктику, Шпицберген, Гренландию и Антарктиду) составило очень вероятно -490 ± 100 кг м-2 год-1 (-123 ± 24 Гт год-1) в 2006–2015 гг.Усредненные по региону запасы массы были вероятно наиболее отрицательными (менее -850 кг м-2 год-1) в южных Андах, Кавказе и европейских Альпах/Пиренеях и наименее отрицательными в Высокогорной Азии (-150 ± 110 кг м-2 в год-1). -2 год-1), но вариации внутри регионов сильны. От 3,6 до 5,2 млн км2 покрыты вечной мерзлотой в одиннадцати высокогорных регионах, рассматриваемых в этой главе, что соответствует 27–29% глобальной площади вечной мерзлоты (, средняя достоверность, ). Разреженные и неравномерно распределенные измерения показывают повышение температуры вечной мерзлоты (высокая достоверность е), например, на 0.19ºC ± 0,05ºC в среднем примерно в 28 местах в европейских Альпах, Скандинавии, Канаде и Азии за последнее десятилетие. Другие наблюдения показывают уменьшение толщины вечной мерзлоты и потерю льда в земле. {2.2.2, 2.2.3, 2.2.4}
Сокращение ледников, снега и вечной мерзлоты изменило частоту, масштабы и местонахождение большинства связанных с ними стихийных бедствий ( высокая степень достоверности ). Подверженность людей и инфраструктуры стихийным бедствиям увеличилась из-за роста населения, туризма и социально-экономического развития ( высокая достоверность ). Отступление ледников и таяние вечной мерзлоты снизили устойчивость горных склонов и целостность инфраструктуры ( высокая достоверность ). Количество и площадь ледниковых озер увеличились в большинстве регионов за последние десятилетия ( высокая достоверность ), но имеется только ограниченное свидетельство того, что частота наводнений из-за прорыва ледниковых озер (GLOF) изменилась. В некоторых регионах количество снежных лавин, связанных с мокрым снегом, увеличилось (, средняя достоверность, ), а дождевые паводки уменьшились на низких высотах весной и увеличились на больших высотах зимой (, средняя достоверность, ).Количество и масштабы лесных пожаров увеличились на западе США отчасти из-за раннего таяния снега (, средняя достоверность, ). {2.3.2, 2.3.3}
Изменения снега и ледников изменили количество и сезонность стока в речных бассейнах с преобладанием снега и ледников ( очень высокая достоверность ) с локальным воздействием на водные ресурсы и сельское хозяйство ( 90 средняя достоверность) . Зимний сток увеличился за последние десятилетия из-за большего количества осадков, выпадающих в виде дождя (, высокая достоверность, ). В некоторых реках, питаемых ледниками, летний и годовой сток увеличился из-за усиленного таяния ледников, но уменьшился там, где талая вода ледников уменьшилась по мере сокращения площади ледников. Уменьшение наблюдалось, особенно в регионах с преобладанием небольших ледников, таких как Европейские Альпы (, средняя достоверность, ). Отступление ледников и изменения снежного покрова способствовали локальному снижению урожайности сельскохозяйственных культур в некоторых высокогорных регионах, включая Гиндукуш, Гималаи и тропические Анды (, средняя достоверность, ).Имеется ограниченных данных о воздействии на работу и производительность гидроэнергетических сооружений в результате сезонных изменений и как увеличения, так и уменьшения поступления воды, например, в Европейских Альпах, Исландии, Западной Канаде и США, а также в тропических Андах. {2.3.1}
Видовой состав и обилие заметно изменились в высокогорных экосистемах за последние десятилетия ( очень высокая достоверность ), отчасти из-за изменений в криосфере ( высокая достоверность ). Места обитания для обустройства ранее отсутствовавших видов открылись или были изменены в результате уменьшения снежного покрова ( высокая достоверность ), отступления ледников ( очень высокая достоверность ) и таяния вечной мерзлоты ( средняя достоверность ). Сокращение площади ледников и снежного покрова напрямую изменило структуру многих пресноводных сообществ (, высокая достоверность, ). Сокращение снежного покрова негативно повлияло на репродуктивную способность некоторых видов растений и животных, зависящих от снега, в том числе на поиск пищи и отношения хищник-жертва у млекопитающих (, высокая достоверность, ).Миграция отдельных видов вверх по склону, в основном из-за потепления и в меньшей степени из-за изменений, связанных с криосферой, часто увеличивала местное видовое богатство ( очень высокая достоверность ). Численность некоторых адаптированных к холоду видов, в том числе эндемиков, в наземных и пресноводных сообществах сократилась (, высокая достоверность, ). В то время как продуктивность растений в целом увеличилась, фактическое воздействие на обеспечивающие, регулирующие и культурные экосистемные услуги сильно различается (, высокая достоверность, ).{2.3.3}
Сокращение снежного покрова, ледников и вечной мерзлоты негативно сказалось на туризме и рекреационной деятельности, такой как катание на лыжах, ледниковый туризм и альпинизм ( средняя достоверность ). В некоторых регионах ухудшение безопасности маршрутов привело к сокращению возможностей для занятий альпинизмом ( средняя достоверность ). Изменчивость и уменьшение естественного снежного покрова поставили под угрозу работу горнолыжных курортов на низких высотах (, высокая достоверность, ).Исчезновение ледников и снежного покрова повлияло на эстетические, духовные и другие культурные аспекты горных ландшафтов (, средняя достоверность, ), ухудшив благосостояние людей (например, в Гималаях, восточной Африке и тропических Андах). {2.3.5, 2.3.6}
Адаптация в сельском хозяйстве, туризме и питьевом водоснабжении была направлена на снижение воздействия изменения криосферы ( средняя достоверность ), хотя имеются ограниченные данные об их эффективности из-за отсутствия формальные оценки или технические, финансовые и институциональные барьеры на пути реализации. В некоторых местах искусственное оснежение уменьшило негативное воздействие на горнолыжный туризм ( средняя достоверность ). Выпуск и хранение воды из водохранилищ в соответствии с отраслевыми потребностями (сельское хозяйство, питьевая вода, экосистемы) уменьшили влияние сезонной изменчивости на сток (, средняя достоверность, ). {2.3.1, 2.3.5}
Будущие прогнозы изменений криосферы, их воздействия и рисков, а также адаптация в высокогорных районах
По прогнозам, снежный покров, ледники и вечная мерзлота будут продолжать сокращаться почти во всех регионах в течение 21 века ( высокая степень достоверности ). По сравнению с 1986–2005 гг., высота снежного покрова на малых высотах уменьшится на 10–40 % в 2031–2050 гг., независимо от репрезентативной траектории концентрации (RCP), и в 2081–2100 гг., вероятно на 10–40 % для RCP2 .6 и на 50–90 % для РТК8.5. Прогнозируемое сокращение массы ледников в период с 2015 по 2100 год составляет вероятно 22–44% для РТК2.6 и 37–57% для РТК8.5. В регионах с преимущественно небольшими ледниками и относительно небольшим ледяным покровом (например, Европейские Альпы, Пиренеи, Кавказ, Северная Азия, Скандинавия, тропические Анды, Мексика, Восточная Африка и Индонезия) к 2100 году ледники потеряют более 80% своей нынешней массы. по РКП8.5 (, средняя достоверность, ), и многие ледники исчезнут независимо от сценария выбросов (, очень высокая достоверность, ). Оттаивание и деградация вечной мерзлоты увеличатся в 21 веке ( очень высокая достоверность ), но количественные прогнозы недостаточны. {2.2.2, 2.2.3}
По прогнозам, большинство типов стихийных бедствий изменятся по частоте, величине и площади, поскольку криосфера продолжает ухудшаться (высокая степень достоверности) . Прогнозируется, что отступление ледников и таяние вечной мерзлоты снизят устойчивость горных склонов и увеличат количество и площадь ледниковых озер (, высокая достоверность, ). Возникающие в результате оползни и наводнения, а также каскадные события также возникнут там, где нет записей о предыдущих событиях (, высокая достоверность, ). Прогнозируется, что количество снежных лавин и расстояние их схода на более низких высотах сократятся, а сходы лавин с мокрым снегом даже зимой будут происходить чаще (, средняя достоверность, ). Паводки, вызванные дождем и снегом, будут происходить раньше весной и позже осенью, чаще на возвышенностях и реже на более низких высотах (, высокая достоверность, ). {2.3.2, 2.3.3}
Речной сток в речных бассейнах с преимущественно снежным и ледниковым питанием будет изменяться по количеству и сезонности в ответ на прогнозируемое снижение снежного покрова и ледников ( очень высокая достоверность ) с негативным воздействием на сельское хозяйство, гидроэнергетика и качество воды в некоторых регионах ( средняя достоверность ). Прогнозируется, что средний зимний сток снеготаяния увеличится ( высокая достоверность ), а весенние пики наступят раньше ( очень высокая достоверность ). Прогнозируемые тенденции годового стока существенно различаются между регионами и могут быть даже противоположными по направлению, но существует высокая степень достоверности того, что во всех регионах среднегодовой сток с ледников достигнет пика, за которым последует снижение стока самое позднее в конец 21 века. Ожидается, что снижение стока снизит продуктивность орошаемого земледелия в некоторых регионах (, средняя достоверность, ). На работу гидроэнергетики будет все больше влиять изменение объема и сезонность подачи воды в результате таяния снега и ледников (, высокая достоверность, ). Выбросы тяжелых металлов, особенно ртути, и других загрязнителей, хранящихся в настоящее время в ледниках и вечной мерзлоте, по прогнозам, снизят качество воды для пресноводной биоты, бытового использования и орошения (, средняя достоверность, ).{2.3.1}
Ожидается, что текущие тенденции связанных с криосферой изменений в высокогорных экосистемах сохранятся, а воздействие усилится ( очень высокая достоверность ). В то время как высокие горы предоставят новые и более обширные ареалы обитания, включая рефугиумы для равнинных видов, прогнозируется как расширение, так и сокращение ареала, а на больших высотах это приведет к сокращению популяции ( высокая достоверность ). Последнее увеличивает риск локального вымирания, в частности, для пресноводных видов, адаптированных к холоду (, средняя достоверность, ).Без генетической пластичности и/или поведенческих сдвигов изменения криосферы будут продолжать негативно влиять на эндемичные и местные виды, такие как некоторые холодноводные рыбы (например, форель) и виды, чьи черты напрямую зависят от снега (например, зайцы-беляки) или многие крупные млекопитающие. средняя достоверность ). Выживание таких видов будет зависеть от соответствующих мер по сохранению и адаптации (, средняя достоверность, ). Многие прогнозируемые экологические изменения изменят экосистемные услуги ( высокая степень достоверности ), повлияв на экологические нарушения (т.г., пожар, камнепад, эрозия склонов) со значительным воздействием на людей ( средняя достоверность ). {2.3.3}
Ожидается, что будущие изменения криосферы во многих регионах негативно повлияют на культурные ценности, такие как покрытые снегом и льдом вершины многих объектов всемирного наследия ЮНЕСКО, а также на туристическую и рекреационную деятельность ( высокая степень достоверности ) . Согласно прогнозам, современные технологии оснежения будут менее эффективны в более теплом климате для снижения рисков для лыжного туризма в большинстве частей Европы, Северной Америки и Японии, в частности при глобальном потеплении на 2°C и выше (, высокая достоверность, ).Диверсификация за счет круглогодичной деятельности поддерживает адаптацию туризма к будущим изменениям климата (, средняя достоверность, ). {2.3.5, 2.3.6}
Факторы и варианты реагирования для содействия адаптации и устойчивому развитию в высокогорных районах
Уже зафиксированное и неизбежное изменение климата, влияющее на все элементы криосферы, независимо от сценария выбросов, требует комплексного планирования адаптации для поддержки и улучшения наличия воды, доступа к ней и управления ею ( средняя достоверность ). Комплексные подходы к управлению водными ресурсами во всех масштабах, в частности, для энергетики, сельского хозяйства, экосистем и снабжения питьевой водой, могут быть эффективными в борьбе с последствиями изменений в криосфере. Эти подходы также предлагают возможности для поддержки социально-экологических систем за счет разработки и оптимизации хранения и сброса воды из водохранилищ (, средняя достоверность, ), при этом учитываются потенциальные негативные последствия для некоторых экосистем.Успех в реализации таких вариантов управления зависит от участия соответствующих заинтересованных сторон, включая затронутые сообщества, разнообразных знаний и адекватных инструментов для мониторинга и прогнозирования будущих условий, а также финансовых и институциональных ресурсов для поддержки планирования и реализации (средняя достоверность) . {2.3.1, 2.3.3, 2.4}
Эффективное управление является ключевым фактором снижения риска бедствий с учетом соответствующих факторов воздействия, таких как планирование, зонирование и урбанизация, а также факторов уязвимости, таких как бедность, которые могут осложнить усилия по обеспечению устойчивости и устойчивого развития сообществ ( средняя достоверность ) . Сокращение ущерба от бедствий зависит от интегрированных и скоординированных подходов к учету соответствующих опасностей, степени воздействия и существующих уязвимых мест. Разнообразные знания, включающие опыт сообщества и многих заинтересованных сторон о прошлых воздействиях, дополняют научные знания для прогнозирования будущих рисков. {CCB-1, 2.3.2, 2.4}
Для некоторых горных регионов и трансграничных речных бассейнов существует международное сотрудничество, договоры и конвенции, которые потенциально могут способствовать действиям по адаптации.Тем не менее, имеются ограниченные данные о том, в какой степени воздействия и потери, возникающие в результате изменений в криосфере, конкретно отслеживаются и учитываются в этих рамках . За последние три десятилетия возник широкий спектр институциональных механизмов и практик, отвечающих общей глобальной программе горных районов и конкретным региональным приоритетам. Существует потенциал для их укрепления, чтобы также реагировать на риски криосферы, связанные с климатом, и открывать возможности для развития посредством адаптации ( ограниченные доказательства, высокая степень согласия ). В Целях устойчивого развития (ЦУР), Сендайской рамочной программе и Парижском соглашении определенное внимание в исследованиях и практике, посвященных горным районам, уделяется мониторингу и отчетности по указанным в них целям и показателям. {2.3.1, 2.4}
Неправильный перевод снижает мутационную нагрузку в развивающихся белках за счет отрицательного эпистаза с мутациями ДНК | Молекулярная биология и эволюция
89″> Введение
мутации ДНК являются сырьем для адаптивной эволюции (Halligan and Keightley 2009; Olson-Manning et al. 2012). Эффект пригодности любой такой мутации может зависеть от других мутаций, с которыми она происходит. Такие неаддитивные или эпистатические взаимодействия между мутациями широко распространены в белках (Bershtein et al.2006 г.; Саркисян и др. 2016), и они могут сильно повлиять на адаптивную эволюцию (Сальверда и др., 2011; Банк и др., 2016). Например, рассмотрим две полезные мутации, взаимодействие которых показывает положительный эпистаз, то есть две мутации вместе приводят к более приспособленному фенотипу, чем можно было бы ожидать, учитывая их индивидуальные эффекты приспособленности. Такой эпистаз наблюдается, когда мутация, вызывающая новую функцию белка, но дестабилизирующая белок, сочетается с мутацией, которая стабилизирует белок (Bloom et al.2006 г.; Сальверда и др. 2017). Положительный эпистаз может ускорить распространение полезных мутаций и, таким образом, способствовать адаптивной эволюции (Weinreich et al. 2006; Salverda et al. 2011; Zheng et al. 2019).
Не все мутации, которые демонстрируют положительный эпистаз с полезными мутациями ДНК, сами должны быть мутациями ДНК. Они также могут быть фенотипическими мутациями, возникающими во время синтеза белка (Goldsmith and Tawfik, 2009). Неправильный перевод, ошибочное включение аминокислот в белки рибосомой, является обильным источником таких фенотипических мутаций, потому что ошибки трансляции встречаются на несколько порядков чаще, чем мутации ДНК (Kramer and Farabaugh 2007; Drummond and Wilke 2008).Рассмотрим транслируемую белковую молекулу, которая несет полезную мутацию ДНК. Если вторая мутация, вызванная неправильным переводом, имеет положительное эпистатическое взаимодействие с генетической мутацией, результатом будет большее увеличение приспособленности, чем ожидалось, когда каждая мутация действует сама по себе. В результате такая комбинация фенотип-мутант ДНК может распространяться в популяции и служить «ступенькой» для дальнейших адаптивных мутаций ДНК. В крайнем случае, если и ДНК, и фенотипические мутации нейтральны или вредны сами по себе, но улучшают приспособленность, когда происходят вместе, может возникнуть теоретически предсказанный феномен, называемый эффектом «упреждения» (Whitehead et al.2008). Это явление может способствовать адаптивной эволюции, усиливая благотворное влияние мутаций ДНК.
Хотя полезные мутации наиболее важны для адаптивной эволюции, их гораздо меньше, чем вредных мутаций. Причина в том, что большинство мутаций ДНК дестабилизируют белки и тем самым повреждают их функцию (Bershtein et al., 2006; Eyre-Walker and Keightley, 2007; Peris et al., 2010; Rockah-Shmuel et al., 2015; Sarkisyan et al., 2016; Wrenbeck et al. др. 2017). Кроме того, вредные мутации, которые накапливаются в процессе эволюции белка, могут постепенно снижать его стабильность и способность к укладке (Bershtein et al.2006 г.; Берштейн и Тауфик, 2008 г.; Чжэн и др. 2020), делают белки более чувствительными к мутациям и, таким образом, еще больше увеличивают частоту вредных мутаций. Когда две или более вредных мутации происходят одновременно, они обычно снижают приспособленность в большей степени, чем можно было бы ожидать, исходя из их аддитивного воздействия на приспособленность, явление, также известное как отрицательный эпистаз (Bershtein et al., 2006; Melamed et al., 2013; Olson et al. 2014; Банк и др., 2015; Саркисян и др., 2016; Гонсалес и Остермайер, 2019).Как следствие, накопление вредных мутаций ДНК может препятствовать адаптивной эволюции, поскольку способствует ухудшению стабильности фолдинга и, таким образом, снижает проникновение неофункционализирующих мутаций, то есть мутаций, которые наделяют белок новой функцией (Masel 2006; Bershtein and Tawfik 2008). ; Чжэн и др., 2020).
Любой механизм, способный устранить вредные мутации ДНК, может облегчить адаптивную эволюцию. Например, рекомбинация ДНК, связанная с половым размножением, может способствовать адаптации путем отделения полезных мутаций от вредных посредством рекомбинации (Mcdonald et al.2016). Сильный отбор может способствовать адаптивной эволюции, удаляя вредные мутации (Masel 2006; Bershtein and Tawfik 2008; Zheng et al. 2020). При очищающем отборе отрицательный эпистаз может помочь устранить вредные мутации, усиливая вредные эффекты отдельных мутаций. Такая амплификация также может быть достигнута за счет фенотипических мутаций, вызванных неправильным переводом. Другими словами, фенотипические мутации могут проявлять негативное взаимодействие с мутациями ДНК и, таким образом, усиливать их пагубные эффекты.Таким образом, неправильный перевод может способствовать устранению вредных мутаций ДНК и помочь естественному отбору удалить их из популяции посредством очищающего отбора. Усиливая очистку от вредных мутаций, это может также повысить эволюционируемость популяции — способность развивать новые и адаптивные фенотипы — в условиях направленного отбора для нового фенотипа.
Предыдущие теоретические исследования показали, что фенотипические мутации могут ускорить адаптивную эволюцию за счет формирования эпистатически взаимодействующих пар фенотип-генотип мутаций (Whitehead et al.2008), но у нас нет подходящих эмпирических доказательств такого эпистаза. Хотя предыдущие исследования показали, что фенотипические мутации, вызванные неправильным переводом, могут влиять на адаптивную эволюцию (Giacomelli et al. 2007; Javid et al. 2014; Bratulic et al. 2015; Fan et al. 2015; Yanagida et al. 2015; Samhita et al. 2020), сделали ли они это благодаря своим положительным или отрицательным эпистатическим взаимодействиям с мутациями ДНК, неизвестно. Например, предыдущая работа показала, что неправильный перевод может помочь избавиться от вредных мутаций в эволюции резистентного к антибиотикам фермента β-лактамазы (Bratulic et al.2017). Однако фенотипы устойчивости к антибиотикам не идеально подходят для обнаружения эпистаза, потому что трудно количественно определить такие фенотипы с высокой точностью и для отдельных клеток. Вместо этого в большинстве соответствующих работ используются полуколичественные показатели устойчивости к антибиотикам, которые определяются как средние значения для популяции (Bratulic et al., 2017; Salverda et al., 2017). Как следствие, в предыдущей работе не удалось установить, является ли эпистаз генетическим механизмом, с помощью которого повышенная неправильная трансляция помогает очищать вредные мутации.Кроме того, неправильный перевод может повлиять на весь протеом и, таким образом, может создать проблему для отделения его эффектов в масштабе протеома от эффектов на отдельные белки.
Чтобы преодолеть эти ограничения, мы здесь используем систему исследования зеленого флуоресцентного белка (GFP), которая позволила нам охарактеризовать фенотипы развивающихся популяций с разрешением одной клетки посредством сортировки клеток, активируемой флуоресценцией (FACS). Эта система исследования позволила нам определить, взаимодействуют ли эпистатически фенотипические мутации с мутациями ДНК.Кроме того, GFP не является нативным для Escherichia coli , что сводит к минимуму его вмешательство в нативный протеом E. coli (Bratulic et al. 2015, 2017). В частности, мы подвергли популяции GFP нескольким раундам направленной эволюции (Материалы и методы) в хозяевах E. coli с высоким или низким уровнем неправильного перевода. Наш эволюционный эксперимент состоял из двух фаз. В фазе I мы подвергли GFP очищающему отбору, направленному на сохранение его предкового фенотипа зеленой флуоресценции.Нашей главной целью было изучить, как неправильный перевод может повлиять на количество мутаций ДНК в популяции. В фазе II мы подвергли популяции GFP с конца фазы I направленному отбору для производного («нового») фенотипа желтой флуоресценции, чтобы изучить, как неправильная трансляция может повлиять на эволюцию белка. Затем мы проанализировали генетические изменения, которые произошли в обеих популяциях, в деталях на молекулярном уровне с помощью высокопроизводительного секвенирования.
97″> Повышенный неверный перевод снижает мутационную нагрузку за счет отрицательного эпистаза между фенотипическими мутациями и мутациями ДНК
Мы выполнили направленную эволюцию GFP в E.coli MG1655 с высокой скоростью неправильной трансляции, вызванной мутацией гена рибосомного белка S4 . Мутация вызывает существенное увеличение ошибок промаха, чтения и сдвига рамки во время синтеза белка (Kramer and Farabaugh 2007; Fan et al. 2015). В качестве контроля мы использовали штамм E. coli MG1655, который был изогенным, за исключением гена рибосомного белка S4 дикого типа, и, таким образом, имел низкую скорость неправильной трансляции (см. Материалы и методы).Для направленной эволюции мы использовали плазмидный вектор, который обеспечивает низкую экспрессию GFP (см. «Материалы и методы»), что сводит к минимуму нагрузку на рост экспрессии GFP у обоих хозяев и делает их уровни экспрессии GFP одинаковыми (дополнительный рисунок S1, дополнительный онлайн-материал). ). Чтобы изучить, снижает ли неправильный перевод мутационную нагрузку и каким образом, мы подвергли четыре повторные популяции GFP четырем раундам («поколениям») направленной эволюции в рамках очищающего отбора на исходную зеленую флуоресценцию путем отбора клеток, флуоресцирующих над фоном, и сделали это как в высоко- и хосты с малым количеством неправильного перевода (популяции H и L на рис.1; см. Материалы и методы). В качестве дополнительных контролей мы развили еще четыре повторяющиеся популяции GFP таким же образом у хозяев как с высоким, так и с низким неправильным переводом, но без отбора (популяции H N и L N для «нейтральной» эволюции в рисунок 1). Мы называем эту часть нашего эксперимента фазой I. В каждом поколении и в каждой повторной популяции фазы I эволюции мы использовали мутагенез полимеразной цепной реакции (ПЦР) для введения ~1,6 мутаций, изменяющих аминокислоты, на молекулу зеленого флуоресцентного белка на поколение ( дополнительные таблицы S1–S3, дополнительный материал онлайн) и развилась популяция из ~10 90 130 6 90 131 вариантов GFP.
Рис. 1.
Экспериментальная эволюция GFP. В фазе I мы подвергли четыре повторные популяции GFP, экспрессированные в хозяине с высоким уровнем неправильной трансляции (красный; популяции H ) или хозяине с низким уровнем неправильной трансляции (синий; популяции L ), четырем поколениям направленной эволюции в условиях очищающего отбора для нативная зеленая флуоресценция (верхняя левая панель), позволяющая выжить клеткам, интенсивность флуоресценции которых превышает 99,9% клеток, не экспрессирующих GFP (зеленая заливка, см. «Материалы и методы»; λ ex = 405 нм и λ em = 525 ± 25 нм).Мы также развили четыре повторяющихся популяции GFP в хозяевах с высоким и низким уровнем неправильной трансляции без отбора, позволив всем клеткам, независимо от их флуоресценции, выжить (популяции H N и L N , нижняя левая панель). ). В фазе II мы подвергли популяции L и H из конца фазы I четырем дальнейшим поколениям сильного направленного отбора на желтую флуоресценцию в условиях высокой неправильной трансляции (обозначены как популяции H → H и L). → H , вверху справа), разрешая только верхний 0.04% клеток выживают (λ ex = 488 нм и λ em = 530 ± 15 нм, см. Материалы и методы). После каждого поколения мы выделяли плазмиды из отобранных клеток и использовали эти плазмиды в качестве матриц для следующего цикла мутации-селекции.
Рис. 1.
Экспериментальная эволюция GFP. В фазе I мы подвергли четыре повторные популяции GFP, экспрессированные в хозяине с высоким уровнем неправильной трансляции (красный; популяции H ) или хозяине с низким уровнем неправильной трансляции (синий; популяции L ), четырем поколениям направленной эволюции в условиях очищающего отбора для естественная зеленая флуоресценция (верхняя левая панель), позволяющая клеткам с интенсивностью флуоресценции выше 99.9% клеток, которые не экспрессируют GFP, выживают (зеленая заливка, см. Материалы и методы; λ ex = 405 нм и λ em = 525 ± 25 нм). Мы также развили четыре повторяющихся популяции GFP в хозяевах с высоким и низким уровнем неправильной трансляции без отбора, позволив всем клеткам, независимо от их флуоресценции, выжить (популяции H N и L N , нижняя левая панель). ). В фазе II мы подвергли популяции L и H из конца фазы I четырем дальнейшим поколениям сильного направленного отбора на желтую флуоресценцию в условиях высокой неправильной трансляции (обозначены как популяции H → H и L). → H , вверху справа), разрешая только верхний 0.04% клеток выживают (λ ex = 488 нм и λ em = 530 ± 15 нм, см. Материалы и методы). После каждого поколения мы выделяли плазмиды из отобранных клеток и использовали эти плазмиды в качестве матриц для следующего цикла мутации-селекции.
В условиях слабого очищающего отбора, удаляющего нефлуоресцирующие варианты, популяции H сохраняли более высокую относительную зеленую флуоресценцию, чем популяции L , в каждом поколении фазы I эволюции (рис. 2А).Это наблюдение подтверждает нашу гипотезу о том, что высокий уровень неправильного перевода снижает мутационную нагрузку. Напротив, популяции H N сохраняли значительно более низкую относительную зеленую флуоресценцию, чем популяции L N , в каждом поколении фазы I эволюции ( P < 0,05, односторонний 90
t 2Б). В частности, относительная зеленая флуоресценция популяций H N была более чем в 1,2 раза ниже, чем у популяций L N на протяжении I фазы эволюции.Чтобы понять генетическую основу этого различия, мы использовали секвенирование одной молекулы в реальном времени (SMRT) для генотипирования ~ 500–2000 вариантов белка каждой репликативной популяции в конце эволюции (дополнительная таблица S1, Дополнительный материал онлайн). Затем мы определили количество аминокислотных мутаций в популяциях H N и L N в каждом поколении. Мы обнаружили, что популяции H N накапливали почти такое же количество мутаций на молекулу белка, как и популяции L N в каждом поколении фазы I (рис.2С). Это указывает на то, что одинаковое количество мутаций на белковую молекулу приведет к большему снижению приспособленности у хозяев с высокой неправильной трансляцией, чем у хозяев с низкой неправильной трансляцией. (Мы используем интенсивность флуоресценции в качестве показателя приспособленности, потому что в наших экспериментах отбор действует именно на флуоресценцию.) наиболее уместно разделить их абсолютную интенсивность флуоресценции на интенсивность предкового GFP в соответствующих хозяевах с высокой и низкой неправильной трансляцией.Эта нормализация объясняет различия в частоте фенотипических мутаций между двумя штаммами-хозяевами. Другими словами, если бы мутации ДНК взаимодействовали аддитивно с мутациями фенотипа, эта нормализация гарантировала бы, что приспособленность мутаций H N и L N будет одинаковой. Напротив, популяции H N показали большее снижение приспособленности, чем популяции L N (рис. 2B), что подразумевает отрицательный эпистаз между фенотипическими мутациями и вредными мутациями ДНК.Чтобы дополнительно подтвердить этот вывод, мы повторно трансформировали выделенные плазмиды популяций L в конце фазы I в хозяев с низким и высоким уровнем неправильной трансляции, а затем сравнили их относительную флуоресценцию с их предками в соответствующих хозяевах. Они сохранили значительно более низкую относительную флуоресценцию у хозяев с высоким уровнем неправильного перевода, чем у хозяев с низким уровнем неправильного перевода ( P < 0,01, односторонний t -тест; рис. 2D), что подчеркивает, что высокий уровень неправильного перевода вызывает вредные мутации ДНК в становятся более вредными из-за негативных эпистатических взаимодействий между фенотипическими мутациями и мутациями ДНК.Рис. 2.
Высокий уровень неправильного перевода снижает мутационную нагрузку, помогая удалять вредные мутации. ( A ) Высокий уровень неправильного перевода снижает мутационную нагрузку, то есть снижение приспособленности, вызванное вредными мутациями, при очищающем отборе. ( B ) Высокий неправильный перевод приводит к большему снижению приспособленности при нейтральной эволюции. На панелях A и B вертикальные оси указывают интенсивность флуоресценции эволюционирующих популяций после каждого поколения (горизонтальные оси) фазы I эволюции относительно предковых популяций GFP.( C ) Количество аминокислотных замен на белковую последовательность в популяциях H N или L N во время фазы I эволюции. Горизонтальная ось указывает время (поколения направленной эволюции), а вертикальная ось указывает количество мутаций, изменяющих аминокислоты, на белковую последовательность. ( D ) Вредоносные мутации приводят к большему снижению приспособленности у хозяина с высоким уровнем неправильного перевода, чем у хозяина с низким уровнем неправильного перевода. Мы повторно трансформировали выделенные плазмиды популяций L в конце фазы I в хозяев с низкой ( L ) и высокой ( H ) неправильной трансляцией, а затем определили их остаточную флуоресценцию по отношению к предковому GFP в соответствующем низком уровне. -неверный и высокий неверный перевод хостов соответственно (вертикальная ось).( E ) Неправильный перевод уменьшает накопление вредных мутаций. Каждая панель показывает эволюционную динамику полезных (слева) и вредных (справа) мутаций в развивающихся популяциях H (красный) и L (синий) во время фазы I эволюции. Столбики погрешностей представляют собой 1 стандартное отклонение на основе четырех повторных популяций (показаны маленькими символами). Мы выполнили односторонние t -тесты, чтобы определить, была ли относительная зеленая флуоресценция (панели A — D ) или количество полезных или вредных мутаций на молекулу белка (панель E ) значительно различалась между популяциями H и L или между популяциями H N и L N .* P < 0,05, ** P < 0,01, **** P < 0,0001.
Рис. 2.
Высокий уровень неправильного перевода снижает мутационную нагрузку, помогая удалять вредные мутации. ( A ) Высокий уровень неправильного перевода снижает мутационную нагрузку, то есть снижение приспособленности, вызванное вредными мутациями, при очищающем отборе. ( B ) Высокий неправильный перевод приводит к большему снижению приспособленности при нейтральной эволюции.На панелях A и B вертикальные оси указывают интенсивность флуоресценции эволюционирующих популяций после каждого поколения (горизонтальные оси) фазы I эволюции относительно предковых популяций GFP. ( C ) Количество аминокислотных замен на белковую последовательность в популяциях H N или L N во время фазы I эволюции. Горизонтальная ось указывает время (поколения направленной эволюции), а вертикальная ось указывает количество мутаций, изменяющих аминокислоты, на белковую последовательность.( D ) Вредоносные мутации приводят к большему снижению приспособленности у хозяина с высоким уровнем неправильного перевода, чем у хозяина с низким уровнем неправильного перевода. Мы повторно трансформировали выделенные плазмиды популяций L в конце фазы I в хозяев с низкой ( L ) и высокой ( H ) неправильной трансляцией, а затем определили их остаточную флуоресценцию по отношению к предковому GFP в соответствующем низком уровне. -неверный и высокий неверный перевод хостов соответственно (вертикальная ось).( E ) Неправильный перевод уменьшает накопление вредных мутаций. Каждая панель показывает эволюционную динамику полезных (слева) и вредных (справа) мутаций в развивающихся популяциях H (красный) и L (синий) во время фазы I эволюции. Столбики погрешностей представляют собой 1 стандартное отклонение на основе четырех повторных популяций (показаны маленькими символами). Мы выполнили односторонние t -тесты, чтобы определить, была ли относительная зеленая флуоресценция (панели A — D ) или количество полезных или вредных мутаций на молекулу белка (панель E ) значительно различалась между популяциями H и L или между популяциями H N и L N .* P < 0,05, ** P < 0,01, **** P < 0,0001.
Усиление таких вредных эффектов может помочь устранить вредные мутации. Чтобы выяснить, так ли это, мы затем определили эффект приспособленности каждой мутации, сравнив ее частоту между популяциями H и H N или между популяциями L и L N после последней генерация фазы I.Мы считали мутацию полезной, если ее частота была значительно выше в популяциях H , чем в популяциях H N , или значительно выше в популяциях L , чем в популяциях L N . И наоборот, мы считали мутацию вредной, если ее частота была значительно ниже в популяциях H , чем в популяциях H N , или значительно ниже в популяциях L , чем в популяциях L N . Затем мы охарактеризовали динамику частоты полезных и вредных мутаций в развивающихся популяциях H и L во время фазы I эволюции.Обе популяции приобрели одинаковое количество полезных мутаций на белковую молекулу в каждом поколении фазы I (рис. 2Е). Напротив, популяций H накапливали значительно меньше вредных мутаций на молекулу YFP в каждом поколении, чем популяций L ( P < 0,05, односторонние t -тесты; рис. 2E). В конце фазы I количество вредных мутаций на молекулу YFP было в 1,61 раза меньше в популяциях H , чем в популяциях L .Этот анализ подтверждает, что повышенный уровень неправильного перевода помог избавиться от вредных мутаций. В целом, усиливая пагубные последствия вредных мутаций, повышенный неправильный перевод помогает уменьшить мутационную нагрузку популяции, то есть снижение приспособленности, вызванное вредными мутациями.
06″> Повышенный неверный перевод помогает избавиться от вредных мутаций во время направленного отбора для нового фенотипа
Чтобы изучить генетические изменения между популяциями H → H и L → H , мы генотипировали примерно 500–2000 вариантов белка на повторную популяцию и на поколение (дополнительная таблица S1, дополнительный материал онлайн).Сначала мы исследовали эволюционную динамику мутаций, изменяющих аминокислоты, и обнаружили, что различные мутации достигают высокой частоты в популяциях H → H и L → H . В частности, мы наблюдали 21 мутацию, частота которых достигала более 30% по крайней мере в одной повторной популяции H → H или L → H в конце эволюции. Среди этих мутаций только одна мутация (C204Y) охватила все повторяющиеся популяции H → H и L → H (дополнительный рис.S2, Дополнительный материал онлайн). Шесть дополнительных мутаций (F65L, K102E, V164A, K167T, I168T и I168V) достигли высоких частот по крайней мере в одной повторной популяции H → H и L → H в эволюционной конечной точке. Поскольку эти мутации достигли высокой частоты в обоих типах популяций, мы называем их «общими» мутациями. Остальные (14 из 21) мутации достигли высокой частоты исключительно в одной повторности популяции H → H или L → H .Мы назвали эти мутации «идиосинкразическими». Три из 14 идиосинкразических мутаций возникли в популяциях H → H , тогда как 11 произошли в популяциях L → H (дополнительный рисунок S2, дополнительный онлайн-материал).
Из-за высокой частоты мутаций и сильного отбора, который мы навязали во время фазы II эволюции, мы подозревали, что некоторые из этих 21 мутаций могут быть нейтральными или вредными и достигли высокой частоты, путешествуя автостопом с полезными мутациями (Nash et al.2005 г.; Чун и Фэй, 2011 г.; Ланг и др. 2013). Чтобы выяснить, так ли это, мы изучили эффекты приспособленности мутаций, которые произошли в популяциях H → H и L → H . Для этого мы проанализировали данные о последовательности эволюционирующих популяций, чтобы определить, изменилась ли частота каждого мутанта сверх того, что можно было бы ожидать только от давления мутаций во время фазы II эволюции.
В частности, мы сначала определили частоту F I каждой мутации в популяциях H и L в конце фазы I.Затем мы определили изменение ΔF в частоте мутантов, которую мы ожидаем в каждом поколении, основываясь только на мутационном давлении. Это давление мутаций вызвано ПЦР, которую мы использовали для мутагенеза в каждом поколении (см. Материалы и методы). Чтобы количественно определить ΔF , мы проанализировали данные последовательности из библиотек предков GFP, которые мы подвергли нашей процедуре мутагенеза фазы II, но не отбору (см. Материалы и методы). Если мутация была нейтральной по отношению к желтой флуоресценции, ее ожидаемая частота после четырех раундов эволюции фазы II должна быть F exp = F I + 4 × ΔF .Затем мы рассчитали наблюдаемую частоту ( F obs ) каждой мутации по данным секвенирования популяций H → H и L → H в конце фазы II. Мы считали мутацию полезной, только если ее частота ( F obs ) была значительно выше ожидаемой частоты ( F exp ). И наоборот, мы считали мутацию вредной, если ее частота ( F obs ) была значительно ниже ожидаемой частоты ( F exp ).
Сначала мы применили эту стратегию, чтобы определить, какая из 21 мутации, частота которых превысила 30%, была полезной. Четыре из семи общих мутаций (F65L, V164A, I168T и C204Y) соответствовали этому критерию ( P < 0,05 , односторонние тесты t ; дополнительный рисунок S3, дополнительный материал онлайн). Кроме того, мы также включили мутацию I168V, которая демонстрировала признаки клональной интерференции с I168T (дополнительные рисунки S4 и S5, дополнительный материал онлайн) (Lang et al.2013).
Затем мы сравнили количество этих пяти полезных мутаций на молекулу GFP между популяциями H → H и L → H во время каждой фазы II поколения. Эти числа были почти одинаковыми между популяциями H → H и L → H (рис. 3B). Кроме того, одни и те же мутации в одинаковой степени накапливались в популяциях H и L во время фазы I эволюции (дополнительный рис.S6A, Дополнительный материал онлайн). Это указывает на то, что слегка более высокая флуоресценция популяций H → H не может быть связана с преимущественным накоплением полезных мутаций.
Затем мы выдвинули гипотезу, что слабо более высокая флуоресценция популяций H → H может существовать, потому что в этих популяциях накапливается меньше вредных мутаций. Хотя селекция устраняет сильно вредные мутации, нейтральные или слегка вредные мутации могут достигать высокой частоты, смешиваясь с другими полезными мутациями.Сначала мы сосредоточили этот анализ на идиосинкразических мутациях, которые достигли высокой частоты только в одной повторной популяции, рассудив, что некоторые из них могут быть слегка вредными и попутно достигать высокой частоты с другими полезными мутациями. Когда мы проанализировали изменения частоты всех 14 идиосинкразических мутаций после фазы II эволюции, мы обнаружили десять таких мутаций с более низкой, чем ожидалось, частотой в популяциях H → H или L → H (дополнительный рис.S3, Дополнительный материал онлайн). Поскольку все эти различия были статистически значимыми или незначительно значимыми (дополнительный рисунок S3, дополнительный онлайн-материал), мы классифицировали эти мутации как вредные. Важно отметить, что девять из них произошли в популяциях L → H , и только один (N106S) произошел в популяции H → H (повтор 1, дополнительный рис. S2, дополнительный материал онлайн). Затем мы изучили динамику десяти высокочастотных вредных мутаций во время фазы II эволюции.Популяции H → H имели меньше высокочастотных вредных мутаций на вариант белка, чем популяции L → H (рис. 3C) в каждом поколении фазы II. В частности, количество высокочастотных вредных мутаций на вариант белка в популяциях H → H было в 4,61–10,24 раза ниже, чем в популяциях L → H во время фазы II эволюции (рис. 3C). . Поскольку популяции H → H и L → H испытали одинаковую силу отбора во время фазы II эволюции, мы пришли к выводу, что эти различия могут быть остатком фазы I эволюции, когда популяции H могли накопить меньше таких мутаций, чем L популяций.Действительно, мы обнаружили, что белки в популяциях H содержали меньше этих мутаций в каждом поколении фазы I, чем в популяциях L (дополнительный рисунок S6B, дополнительный материал онлайн). В частности, в конце фазы I число этих мутаций на молекулу белка было в 1,33 раза меньше в популяциях H , чем в популяциях L . Это согласуется с наблюдением, что семь из десяти высокочастотных вредных мутаций также были вредны для исходного фенотипа зеленой флуоресценции (дополнительный рис.S7, Дополнительный материал онлайн). Эти наблюдения подтверждают, что в популяциях H → H накопилось меньше таких вредных мутаций, чем в популяциях L → H во время фазы II эволюции, потому что популяции H с высоким уровнем неправильного перевода накопили их меньше, чем с низким уровнем неправильного перевода. неправильный перевод популяции L во время фазы I эволюции.
Для дальнейшего подтверждения нашей гипотезы о том, что вредные мутации являются ключевым фактором любого преимущества, которое может иметь неправильный перевод, мы использовали тот же подход (рис.2Е и дополнительный рис. S3, дополнительный материал онлайн) для оценки влияния приспособленности на все мутации, независимо от их конечной частоты, как на зеленую, так и на желтую флуоресценцию, а также во время фазы I и II эволюции. Этот анализ показал, что 395 мутаций вредны для исходного фенотипа зеленой флуоресценции, а 295 из них также вредны для желтой флуоресценции (рис. 4А). Это указывает на то, что 74,5% мутаций, которые были вредны для предкового фенотипа, также были вредны для нового фенотипа.Мы назвали эти мутации безусловно вредоносными. Они могут вызывать укорочение белка или снижать способность и стабильность белка сворачиваться и, таким образом, могут быть вредными для обоих фенотипов (Masel 2006; Rockah-Shmuel et al. 2015). Мы подозревали, что их элиминация во время фазы I уменьшит их накопление во время фазы II, что может объяснить несколько более высокую флуоресценцию популяций H → H в фазе II. Для подтверждения этой гипотезы мы изучили их динамику в течение I и II фаз эволюции.Действительно, на протяжении всей фазы I эволюции популяции H с высоким уровнем неправильного перевода содержали значительно меньше безоговорочно вредных мутаций на молекулу белка, чем популяции с низким уровнем неправильного перевода L ( P < 0,05, односторонний t — тесты; рис. 4Б). В конце фазы I количество этих мутаций в популяции H было в 1,65 раза меньше, чем в популяции L . При направленной эволюции в сторону желтой флуоресценции в фазе II популяции H → H также содержали меньше таких мутаций на вариант белка в каждом поколении, чем популяции L → H (рис.4Б). Эти наблюдения еще раз подтвердили, что очистка от вредных мутаций путем неправильного перевода важна во время адаптивной эволюции.
Рис. 4.
Повышенный неправильный перевод снижает накопление мутаций, вредных как для предков (зеленый), так и для новых (желтый) фенотипов. ( A ) Количество мутаций с вредным воздействием на зеленую флуоресценцию (зеленый эллипс), желтую флуоресценцию (желтый эллипс) и зеленую и желтую флуоресценцию (перекрывающиеся области зеленого и желтого эллипсов).Мы считали мутацию вредной для зеленой флуоресценции, если ее частота была значительно ниже в популяциях H N , или значительно ниже в популяциях L , чем в популяциях L N после I фазы эволюции. ( P < 0,05, односторонние t -тесты). Мы считали мутацию вредной для желтой флуоресценции, если ее частота ( F obs ) в популяциях H → H или L → H была значительно ниже ожидаемой частоты ( F 2 exp ) после фазы II эволюции (подробности см. в основном тексте).( B ) Количество мутаций на вариант белка, которые были вредны как для зеленой, так и для желтой флуоресценции во время фазы I (слева) и фазы II (справа) эволюции. Горизонтальные оси показывают поколения направленной эволюции. Вертикальные оси указывают количество вредных мутаций на вариант белка в соответствующих популяциях. Количество вредоносных мутаций в популяциях L — H не уменьшилось, возможно, потому, что некоторые из этих вредных мутаций сопровождались полезными мутациями (дополнительный рис.S2, Дополнительный материал онлайн). Мы выполнили односторонние t -тесты, чтобы определить, было ли количество вредных мутаций на вариант белка в каждом поколении значительно ниже в популяциях H , чем в популяциях L во время фазы I эволюции, и было ли оно значительно ниже в H → H , чем в L → H во время II фазы эволюции. * P < 0,05, ** P < 0,01, **** P < 0.0001.
Рис. 4.
Повышенный неправильный перевод уменьшает накопление мутаций, вредных как для наследственных (зеленый), так и для новых (желтый) фенотипов. ( A ) Количество мутаций с вредным воздействием на зеленую флуоресценцию (зеленый эллипс), желтую флуоресценцию (желтый эллипс) и зеленую и желтую флуоресценцию (перекрывающиеся области зеленого и желтого эллипсов). Мы считали мутацию вредной для зеленой флуоресценции, если ее частота была значительно ниже в популяциях H N , или значительно ниже в популяциях L , чем в популяциях L N после I фазы эволюции. ( P < 0.05, односторонний т -испытания). Мы считали мутацию вредной для желтой флуоресценции, если ее частота ( F obs ) в популяциях H → H или L → H была значительно ниже ожидаемой частоты ( F 2 exp ) после фазы II эволюции (подробности см. в основном тексте). ( B ) Количество мутаций на вариант белка, которые были вредны как для зеленой, так и для желтой флуоресценции во время фазы I (слева) и фазы II (справа) эволюции.Горизонтальные оси показывают поколения направленной эволюции. Вертикальные оси указывают количество вредных мутаций на вариант белка в соответствующих популяциях. Количество вредных мутаций в популяциях L – H не уменьшилось, возможно, из-за того, что некоторые из этих вредных мутаций сопровождались полезными мутациями (дополнительный рис. S2, дополнительный материал онлайн). Мы выполнили односторонние t -тесты, чтобы определить, было ли количество вредных мутаций на вариант белка в каждом поколении значительно ниже в популяциях H , чем в популяциях L во время фазы I эволюции, и было ли оно значительно ниже в H → H , чем в L → H во время II фазы эволюции.* P < 0,05, ** P < 0,01, **** P < 0,0001.
24″> Материалы и методы
28″> Подготовка электрокомпетентных ячеек
Мы использовали ступенчатое центрифугирование в глицерине/манните, как описано в предыдущем исследовании, для получения электрокомпетентных клеток (Bratulic et al. 2015). В частности, мы инокулировали 90 129 штаммов E. coli в 5 мл среды SOB и выращивали их в течение ночи при 37 °C и 220 об/мин. Затем мы перенесли 3 мл ночной культуры в 300 мл среды SOB и продолжили инкубацию при 37 °C и 220 об/мин до тех пор, пока значение OD 600 не достигло 0.4–0,6 (длина оптического пути: 1 см; ~ 2–4 ч). Затем мы поместили культуру на лед не менее чем на 15 минут, центрифугировали ее при 1500×g/4 °C в течение 15 минут для сбора клеток и использовали 60 мл охлажденного льдом ddH 2 O для ресуспендирования клеток и их распределения. в три пробирки по 50 мл. Затем мы медленно добавляли 10 мл охлажденного льдом раствора глицерина/маннита (20% глицерина [масса/объем] и 1,5% маннита [масса/объем]) на дно каждой пробирки с помощью 10-мл пипетки. Мы собирали клетки центрифугированием при 1500×g и 4 °C в течение 15 минут с ускорением/замедлением, установленным на ноль.Мы аспирировали супернатант и ресуспендировали осадки, используя ∼3 мл охлажденного льдом раствора глицерина/маннита. Мы распределяли полученные суспензии в предварительно охлажденные пробирки объемом 1,5 мл, помещали их в ванну с сухим льдом и этанолом примерно на 1 минуту и хранили при температуре -80 °C для электропорации.
35″> Создание библиотек мутантов
Сначала мы трансформировали очищенные продукты лигирования (мутантные библиотеки) в электрокомпетентные клетки DH5α для метилирования плазмидной ДНК. Такое метилирование может повысить эффективность трансформации у хозяев дикого типа и склонных к ошибкам. В частности, мы смешали 50 мкл электрокомпетентных клеток DH5α с 4 мкл продукта лигирования и перенесли смесь в кювету 0,2 см (EP202, Cell Projects, Соединенное Королевство). Мы провели электропорацию с использованием электропоратора Micropulser (Bio-Rad) при настройке EC3 (15 кВ/см).После электропорации сразу добавляли 450 мкл предварительно подогретой среды SOC. Суспензию переносили в пробирку объемом 10 мл и инкубировали при 37 °С в течение 1,5 ч при встряхивании при 220 об/мин в инкубаторе-качалке (INFORS HT, Швейцария). Затем мы добавили 2,5 мл среды LB с 36 мкг/мл канамицина (K1377, Sigma) для продолжения инкубации в течение ночи. Чтобы оценить размер библиотеки, мы серийно разводили аликвоты клеток по 10 мкл (в физиологическом растворе) и высевали их на агар LB с 20 мкг/мл канамицина. Этот протокол трансформации привел к размеру библиотеки ~10 6 колониеобразующих единиц для каждой повторной популяции.Впоследствии мы использовали набор QIAprep spin miniprep (Qiagen, Германия) для извлечения плазмид (библиотек метилированных мутантов) из ночной культуры.
39″> Эволюция GFP в рамках направленного отбора для желтой флуоресценции
Мы следовали той же процедуре, что описана в разделе «Эволюция GFP при очищающей селекции по зеленой флуоресценции», для трансформации метилированных мутантных библиотек в склонные к ошибкам компетентные клетки и подготовили эти эволюционирующие популяции для сортировки (популяции H → H и L → H ; рис. 1). Мы использовали сортировщик клеток Aria III (BD Biosciences) для сортировки клеток при 4 °C с использованием канала FITC (λ ex = 488 нм, λ em = 530 ± 15 нм) и точности сортировки Single Cell Purity. .Мы отобрали 2 × 10 4 клеток в верхних 2% интенсивности желтой флуоресценции (измеренной как FITC-H) со скоростью сортировки ~10 4 событий/с. Мы повторно вырастили отсортированные клетки в течение ночи и выделили плазмиды из ночной культуры. Мы повторно трансформировали выделенную плазмиду в склонные к ошибкам компетентные клетки, как описано выше. Мы повторили процесс сортировки, отобрав 10 4 клеток в верхних 2% интенсивности желтой флуоресценции. Затем мы использовали плазмиды, выделенные из отсортированных клеток, в качестве матриц для следующего цикла мутации-селекции.После каждого поколения эволюции мы подвергали изолированные варианты SMRT-секвенированию.
43″> Анализ данных проточной цитометрии
Мы провели анализ данных проточной цитометрии с помощью FlowJo V10.4.2 (LLC). В частности, мы сначала выбрали гомогенную клеточную популяцию, используя графики плотности прямого рассеяния (FSC-H) по сравнению с высотой бокового рассеяния (SSC-H).Затем мы исключили дублеты, используя графики зависимости площади бокового рассеяния (SSC-A) от плотности высоты бокового рассеяния. Мы рассчитали среднюю интенсивность флуоресценции каждой биологической реплики, используя полученные отфильтрованные данные.
48″> Первичный анализ данных
Мы выполнили анализ данных секвенирования SMRT с использованием пакета SMRT Link SMRT Link V9.0.0.
. Мы использовали протокол «Circular Consensus Sequences (CCS)» для сборки согласованных чтений из одноцепочечных субчтений. Чтобы отфильтровать чтения вставок GFP, мы установили число субчтений полного прохода на ≥3, прогнозируемую консенсусную точность на ≥0,99 и длину вставки на 600–1500 bp. Мы использовали приложение «Демультиплексирование штрих-кодов» для демультиплексирования результирующих данных, установив «Минимальный балл штрих-кода» на 80 и «Фильтровать минимальное качество штрих-кода» на 26.Затем мы сопоставили демультиплексированные чтения с наследственной последовательностью GFP, используя BLASR (Чейссон и Теслер, 2012), установив длину сопоставления на ≥700 bp и точность сопоставления на ≥0,9. Из данных картирования мы определили сопоставленные чтения, которые охватывают всю область кодирования GFP и имеют среднее качество Phred выше 20. Это генерировало ~ 500–2000 прочтений для каждой повторной популяции в каждом поколении (дополнительная таблица S1, Дополнительный материал онлайн) . Мы использовали эти чтения только для дальнейшего анализа.52″> Статистический анализ
Если не указано иное, для статистического анализа данных использовали односторонние t -критерии. Мы выполнили весь статистический анализ, используя R версии 4.0.3.
56″ data-legacy-id=»ack1″> Благодарности
Эта работа была поддержана Европейским исследовательским советом (ERC) Advanced Grant 739874 и грантом Швейцарского национального научного фонда 31003A_172887. Мы благодарим Центр функциональной геномики в Цюрихе и центр проточной цитометрии в Цюрихском университете за экспериментальную поддержку. Дж.З. благодарит д-ра Шраддху Карве, д-ра Мириам Оломбрада Сакристан, д-ра Карлу Белло и д-ра Бхарата Рави за экспериментальную поддержку и помощь в анализе данных.
60″ data-legacy-id=»ref1″> Ссылки
Агравал
AF
,Уитлок
МС.
2012
.Мутационная нагрузка: приспособленность особей к популяциям с большим количеством вредных аллелей
.Annu Rev Ecol Evol Syst
.43
(1
):115
–150
.Балестерин
м
,Фредрикссон
,AREDRIKSSON
A
,Henriksson
J
,NYSTRÖM
T.
2001
.Бактериальное старение: окисление белков в непролиферирующих клетках определяется точностью рибосом
.EMBO J
.20
(18
):5280
–5289
.Банк
C
,Hietpas
RT
,Jensen
JD
,Болон
ДНК.
2015
.Систематический обзор внутригенного эпистатического ландшафта
.Мол Биол Эвол
.32
(1
):229
–238
.Банк
C
,Матушевский
S
,Hietpas
RT
,Jensen
JD.
2016
.О (не)предсказуемости большого ландшафта внутригенной приспособленности
.Proc Natl Acad Sci U S A
.113
(49
):14085
–14090
.Bershtein
S
,S
,Segal
M
,Bekerman
R
,Tokuriki
N
,TAWFIK
DS.
2006
.Связь между устойчивостью и эпистазом формирует ландшафт приспособленности случайно дрейфующего белка
.Природа
444
(7121
):929
–932
.Берштейн
S
,Тауфик
ДС.
2008
.Новый взгляд на модель Оно: измерение частоты потенциально адаптивных мутаций при различных мутационных дрейфах
.Мол Биол Эвол
.25
(11
):2311
–2318
.Блум
JD
,Лабтавикул
ST
,Отей
CR
,Арнольд
FH.
2006
.Стабильность белков способствует эволюции
.Proc Natl Acad Sci U S A
.103
(15
):5869
–5874
.Bratulic
S
,Gerber
F
,Wagner
A.
2015
.Неправильный перевод способствует развитию надежности β-лактамазы TEM-1
.Proc Natl Acad Sci U S A
.112
(41
):12758
–12763
.Bratulic
S
,Toll-Riera
M
,Wagner
A.
2017
.Неправильный перевод может улучшить приспособленность за счет очистки от вредных мутаций
.Нац Коммуна
.8
:15410
.Шэссон
МДж
,Теслер
Г.
2012
.Картирование считываний секвенирования отдельных молекул с использованием базового локального выравнивания с последовательным уточнением (BLASR): применение и теория
.Биоинформатика BMC
13
:238
.Чарльзворт
Б.
1990
.Баланс мутаций и отбора и эволюционное преимущество пола и рекомбинации
.Жене Рез
.55
(3
):199
–221
.Чун
С
,Фэй
ДК.
2011
.Доказательства наличия вредных мутаций в геноме человека
.ПЛОС Жене
.7
(8
):e1002240
.Драммонд
DA
,Wilke
CO.
2008
.Неправильный фолдинг белка, вызванный неправильной трансляцией, как основное ограничение эволюции кодирующей последовательности
.Сотовый
134
(2
):341
–352
.Эйр-Уокер
А
,Кейтли
ПД.
2007
.Распределение эффектов приспособленности новых мутаций
.Nat Rev Genet
.8
(8
):610
–618
.вентилятор
Y
,WU
J
,J
,UNG
MH
,
de Lay
N
,
Чэн
C
,Ling
J.
2015
.Неправильный перевод белка защищает бактерии от окислительного стресса
.Рез. нуклеиновых кислот
.43
(3
):1740
–1748
.Garofalo
R
,R
,Wohlgemuth
I
,Pearson
M
,Lenz
C
,URLAUB
H
,RODNINA
MV.
2019
.Широкий диапазон частот ошибок миссенс в клеточных белках
.Рез. нуклеиновых кислот
.47
(6
):2932
–2945
.Джакомелли
MG
,Hancock
AS
,Masel
J.
2007
.Преобразование 3′-UTR в кодирующие области
.Мол Биол Эвол
.24
(2
):457
–464
.Ювелир
М
,Тауфик
ДС.
2009
.Потенциальная роль фенотипических мутаций в эволюции экспрессии и стабильности белка
.Proc Natl Acad Sci U S A
.106
(15
):6197
–6202
.Гонсалес
CE
,Остермайер
М.
2019
.Распространенный попарный внутригенный эпистаз среди последовательных мутаций β-лактамазы ТЕМ-1
.Дж Мол Биол
.431
(10
):1981
–1992
.Halligan
DL
,Keightley
PD.
2009
.Исследования накопления спонтанных мутаций в эволюционной генетике
.Annu Rev Ecol Evol Syst
.40
(1
):151
–172
.Javid
B
,B
,Sorrentino
F
,TOOSKY
M
,ZHENG
W
,Pinkham
JT
,JAIN
N
,PAN
M
,Дейган
П
,Рубин
ЭЖ
,Портной
ДА.
2014
.Неправильный перевод микобактерий необходим и достаточен для фенотипической устойчивости к рифампицину
.Proc Natl Acad Sci U S A
.111
(3
):1132
–1137
.Kramer
EB
,Фарабо
PJ.
2007
.Частота ошибок перевода E. coli во многом определяется конкуренцией тРНК
.РНК
13
(1
):87
–96
.Laehnemann
D
,Borkhardt
A
,McHardy
AC.
2016
.Удаление шума из данных глубокого секвенирования ДНК — ошибки высокопроизводительного секвенирования и их исправление
.Бриф Биоинформ
.17
(1
):154
–179
.Lang
GI
,RISE
DP
,
DP
,
HICKMAN
MJ
,SODERGREN
E
,WEINSTOCK
GM
,Botstein
D
,Desai
мм.
2013
.Распространенное генетическое перемещение автостопом и клональная интерференция в сорока эволюционирующих популяциях дрожжей
.Природа
500
(7464
):571
–574
.Линч
М
,Мясник
D
,Бюргер
Р
,Габриэль
В.
10330033
3
Мутационный кризис в бесполых популяциях
.Дж Херед
.84
(5
):339
–344
.Линч
М
,Габриэль
В.
1990
.Мутационная нагрузка и выживание небольших популяций
.Evolution (Нью-Йорк)
44
(7
):1725
–1737
.Мазель
Ж.
2006
.Загадочные генетические вариации обогащены потенциальными адаптациями
.Генетика
172
(3
):1985
–1991
.Mcdonald
MJ
,Рис
DP
,Десаи
ММ.
2016
.Секс ускоряет адаптацию, изменяя динамику молекулярной эволюции
.Природа
531
(7593
):233
–236
.Меламед
D
,Янг
DL
,Гэмбл
CE
,Миллер
0 CR 9 0 002
2013
.Глубокое мутационное сканирование домена RRM поли(А)-связывающего белка Saccharomyces cerevisiae
.РНК
19
(11
):1537
–1551
.Miranda
I Miranda
I
,Silva-dias
A
,ROCHA
R
,Teixeira-Santos
R
,Coelho
C
,Gonçalves
T
,Santos
МАС
,Пина-Ваз
С
,Солис
НВ
,Наполнитель
СГ
и др.2013
.Candida albicans Неправильный перевод CUG представляет собой механизм создания вариаций клеточной поверхности
.МБио
.4
(4
):e00285–13
.Mordret
E
,Dahan
O
,ASRAF
o
O
,RAK
R
,
Yehonadav
A
,Barnabas
GD
,COX
J
,Geiger
T
,Lindner
AB
,Pilpel
Y.
2019
.Систематическое обнаружение аминокислотных замен в протеомах раскрывает механистическую основу рибосомных ошибок и отбора на точность трансляции
.молярная ячейка
.75
(3
):427
–441.e5
.NASH
D
,NAIR
S
,S
,Mayxay
M
,Newton
PN
,
GUTHMANN
J-P
,Nosten
F
,Anderson
TJ.
2005
.Сила отбора и автостоп вокруг двух генов устойчивости к малярии
.Proc Biol Sci
.272
(1568
):1153
–1161
.Olson
CA
,Wu
NC
,Sun
R.
2014
.Подробное биофизическое описание парного эпистаза во всем белковом домене
.Карр Биол
.24
(22
):2643
–2651
.Олсон-Мэннинг
CF
,Вагнер
MR
,Митчелл-Олдс
Т.
2012
.Адаптивная эволюция: оценка эмпирической поддержки теоретических предсказаний
.Nat Rev Genet
.13
(12
):867
–877
.Peris
JB
,Davis
P
,CUEVAS
JM
,NEBOT
MR
,SANJUAN
R.
2010
.Распределение эффектов приспособленности, вызванных однонуклеотидными заменами в бактериофаге f1
.Генетика
185
(2
):603
–609
.Роках-Шмуэль
L
,Тот-Петроци
Á
,Тауфик
DS.
2015
.Систематическое картирование пространства белковых мутаций путем длительного дрейфа выявляет пагубные эффекты, казалось бы, нейтральных мутаций
.PLoS Comput Biol
.11
(8
):e1004421
.Salverda
MLM
,Dellus
E
,E
,
GORTER
FA
,,
AJM
,VAN DER OOST
J
,Hoekstra
RF
,TAWFIK
DS
,де Виссер
JAGM.
2011
.Начальные мутации направляют альтернативные пути эволюции белков
.ПЛОС Жене
.7
(3
):e1001321
.Salverda
MLM
,Koomen
J
,J
,Koopmanschap
B
,Zwart
MP
,de Visser
JAGM.
2017
.Адаптивные преимущества от небольших запасов мутаций в ферменте устойчивости к антибиотикам
.Proc Natl Acad Sci U S A
.114
(48
):12773
–12778
.Самхита
Л
,Раваль
ПК
,Агаше
Д.
2020
.Общий неверный перевод увеличивает выживаемость клеток в условиях стресса в Escherichia coli
.ПЛОС Жене
.16
(3
):e1008654
.Sarkisyan
KS
,Болотин
DA
,MEER
MV
,USMANOVA
DR
,MISHIN
AS
,Sharonov
GV
,Ivankov
DN
,Божанова
НГ
,Баранов
МС
,Сойлемез
О
, и др.2016
.Местный фитнес-ландшафт зеленого флуоресцентного белка
.Природа
533
(7603
):397
–401
.Токурики
N
,Тауфик
ДС.
2009
.Сверхэкспрессия шаперонина способствует генетической изменчивости и эволюции ферментов
.Природа
459
(7247
):668
–673
.Weinreich
DM
,Delaney
NF
,DePristo
MA
,Hartl
DL.
2006
.Дарвиновская эволюция может следовать только очень немногим мутационным путям к более приспособленным белкам
.Наука
312
(5770
):111
–114
.Whitead
DJ
,Wilke
CO
,Vernazobres
D
,Bornberg-Bauer
E.
2008
.Упреждающий эффект фенотипических мутаций
.Биол Директ
.3
:18
.Wilke
CO
,Adami
C.
2001
.Взаимодействие между направленным эпистазом и средними мутационными эффектами
.Proc Biol Sci
.268
(1475
):1469
–1474
.Wrenbeck
EE
,Azouz
LR
,Whitehead
TA.
2017
.Ландшафты приспособленности одной мутации для фермента на нескольких субстратах показывают, что специфичность глобально закодирована
.Нац Коммуна
.8
:1
–10
.Yanagida
Yanagida
H
,GISPAN
A
,Kadouri
N
,
ROZEN
S
,Sharon
S
M
,
BARKAI
N
,TAWFIK
DS.
2015
.Эволюционный потенциал фенотипических мутаций
.ПЛОС Жене
.11
(8
):e1005445
.Zaccolo
M
,M
,Williams
DM
,Brown
DM
,Gherardi
E.
1996
.Подход к случайному мутагенезу ДНК с использованием смесей трифосфатных производных аналогов нуклеозидов
.Дж Мол Биол
.255
(4
):589
–603
.zaslaver
ZASLAVER
A
,BREN
A
,
Ronen
M
,iszkovitz
S
,Kikoin
I
,Shavit
S
,Lebermeister
W
,Surette
MG
,Alon
U.
2006
.Обширная библиотека флуоресцентных репортеров транскрипции для Escherichia coli
.Естественные методы
.3
(8
):623
–628
.Чжэн
Дж
,Го
Н
,Вагнер
А.
2020
.Отбор увеличивает эволюционируемость белка за счет повышения устойчивости к мутациям и гибкости
.Наука
370
(6521
):eabb5962
.Чжэн
Дж
,Пейн
ДжЛ
,Вагнер
А.
2019
.Загадочная генетическая изменчивость ускоряет адаптивную эволюцию, открывая доступ к разнообразным адаптивным вершинам
.Наука
365
(6451
):347
–353
.© Автор(ы), 2021 г. Опубликовано Oxford University Press от имени Общества молекулярной биологии и эволюции.
Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution License (https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/), которая разрешает неограниченное повторное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии, что оригинал работа цитируется правильно.%PDF-1.5 % 652 0 объект > эндообъект внешняя ссылка 652 98 0000000016 00000 н 0000003207 00000 н 0000003388 00000 н 0000003424 00000 н 0000003964 00000 н 0000004001 00000 н 0000004115 00000 н 0000005759 00000 н 0000007770 00000 н 0000009603 00000 н 0000011451 00000 н 0000013340 00000 н 0000015273 00000 н 0000015800 00000 н 0000016367 00000 н 0000016778 00000 н 0000016890 00000 н 0000016984 00000 н 0000017568 00000 н 0000018204 00000 н 0000018670 00000 н 0000019237 00000 н 0000019577 00000 н 0000021492 00000 н 0000023479 00000 н 0000026129 00000 н 0000031930 00000 н 0000036845 00000 н 0000039179 00000 н 0000039216 00000 н 0000039330 00000 н 0000039741 00000 н 0000056077 00000 н 0000056152 00000 н 0000056181 00000 н 0000056260 00000 н 0000056357 00000 н 0000056503 00000 н 0000056816 00000 н 0000056871 00000 н 0000056987 00000 н 0000057103 00000 н 0000057227 00000 н 0000057302 00000 н 0000057415 00000 н 0000057786 00000 н 0000057861 00000 н 0000057892 00000 н 0000057967 00000 н 0000074505 00000 н 0000074838 00000 н 0000074904 00000 н 0000075020 00000 н 0000075043 00000 н 0000075121 00000 н 0000075523 00000 н 0000075589 00000 н 0000075705 00000 н 0000075780 00000 н 0000075897 00000 н 0000076198 00000 н 0000076262 00000 н 0000076293 00000 н 0000076368 00000 н 0000087379 00000 н 0000087711 00000 н 0000087777 00000 н 0000087895 00000 н 0000087926 00000 н 0000088001 00000 н 0000099709 00000 н 0000100041 00000 н 0000100107 00000 н 0000100225 00000 н 0000100750 00000 н 0000101074 00000 н 0000101149 00000 н 0000101180 00000 н 0000101255 00000 н 0000108023 00000 н 0000110158 00000 н 0000110484 00000 н 0000110550 00000 н 0000110667 00000 н 0000117435 00000 н 0000124203 00000 н 0000126338 00000 н 0000131652 00000 н 0000132092 00000 н 0000144271 00000 н 0000247446 00000 н 0000248345 00000 н 0000248419 00000 н 0000248543 00000 н 0000248939 00000 н 0000249478 00000 н 0000003017 00000 н 0000002302 00000 н трейлер ]/Предыдущая 529497/XRefStm 3017>> startxref 0 %%EOF 749 0 объект >поток hlQ]HSa~x6نQ*Fʟ /f9[ejVGs9uv鍠ՅW].