RIME обычно включает оценку пептидов, идентифицированных в обеих реакциях IP со специфическим антителом, но не контрольных IgG IP. Анализ онтологии генов также часто выполняется в тестах RIME для определения биологических путей, в которых участвует интересующий белок.

Последние публикации и открытия RIME

С момента первой публикации RIME в 2013 году многие лаборатории, особенно в области исследований рака, использовали этот метод в своих исследованиях и уже опубликовали результаты. Дальнейшие исследования и оптимизация протокола RIME выполняются нашей группой Epigenetic Services и другими.

Ниже мы суммируем некоторые публикации, которые показывают влияние и применимость метода RIME.

RIME и рак молочной железы

Группа исследователей во главе с первым автором Робертом Витвитки из Института рака Дана-Фарбер в Бостоне охарактеризовала фактор транскрипции TRPS1 как специфический репрессор транскрипции при раке молочной железы.Они использовали RIME, чтобы охарактеризовать механизм, с помощью которого TRPS1 репрессирует транскрипцию.

Группа исследователей идентифицировала 214 и 147 белков, связанных с TRSP1, в клетках рака молочной железы HCC3153 и MDA-IBC3 соответственно. Ограничив анализ транскрипционными и эпигенетическими регуляторами, они смогли найти комплекс NuRD и его компоненты, включая CHD4, MTA1-3, HDAC1/2, GATAD2B/A, в качестве лучших результатов. Эти совпадения были проверены с помощью иммуноблоттинга, и они также провели эксперименты ChIP-Seq для дальнейшего подтверждения своих результатов.

Использование RIME для изучения ингибиторов бромодомена

Энхансеры отмечены наличием определенных эпигенетических модификаций, таких как ацетилирование гистона h4 по лизину 27 (h4K27Ac), но как эти модификации действуют на энхансеры, пока неясно. Команда из отдела онкологии Discovery в Genentech начала исследовать этот эпигенетический процесс.

Используя ингибитор бромодомена CBP/p300 GNE-049, исследователи смогли показать, что CBP/p300 специфически ацетилирует h4K27Ac.Кроме того, эксперименты ChIP-Seq показали, что CBP/p300 действует исключительно на энхансерные области. Используя RIME, ученые не выявили изменений в составе партнеров по связыванию p300 при лечении ингибитором.

Таким образом, группа показала, что CBP/p300 имеет решающее значение для ацетилирования h4K27 в энхансерах и что эта модификация необходима для поддержания активности энхансера. Их результаты также показали, что ингибитор бромодомена, который они изучали, не мешал взаимодействиям между p300 и другими белковыми кофакторами.

Анализ комплексов, ремоделирующих хроматин, с помощью RIME

CHD1 является АТФ-зависимым ремоделером хроматина, локализующимся на промоторах активно транскрибируемых генов и облегчающим инициацию транскрипции за счет выселения нуклеосом.

Этот ремоделирующий хроматин белок наиболее часто делетируется при первичном раке предстательной железы человека, встречаемость составляет примерно 15%. Группа Weill Cornell Medicine под руководством Майкла Аугелло исследовала роль CHD1 в развитии рака предстательной железы и опубликовала свои результаты в журнале Cancer Cell .

Во-первых, они продемонстрировали, что CHD1 действует как опухолевой супрессор при раке предстательной железы и что функция опухолевого супрессора, вероятно, не зависит от его специфической для промотора роли. Затем они использовали RIME для определения связанного с хроматином интерактома CHD1 и сравнили его со специфичным для промотора контролем с использованием модификации h4K4me3.

Их сравнение показало, что 33% интерактома приходится на долю факторов, идентифицированных как связанные с CHD1, и промоторы, ассоциированные с белками. Они также обнаружили, что интерактом CHD1 предпочтительно содержит белки, ассоциированные с промотором.Дальнейший анализ показал, что большая часть интерактома CHD1 уникальна для CHD1. Сравнение с интерактомом рецептора андрогенов (AR) показало, что CHD1 и AR имеют 45% общего интерактома, что указывает на независимый от промотора интерактом CHD1 и потенциальную роль в его регуляции.

Дальнейшие эксперименты показали, что CHD1 может регулировать активность ядерных рецепторов, и показали, что CHD1 является добросовестным супрессором опухоли в ткани предстательной железы.

Как начать использовать RIME в своих исследованиях

Чтобы начать работу с RIME в своей лаборатории, вы можете проконсультироваться с нами в Active Motif, поскольку мы предлагаем комплексную услугу RIME.Чтобы воспользоваться нашей услугой RIME, вам просто нужно отправить нам свои образцы (клетки или ткани), и вы получите проанализированные данные обратно в течение нескольких недель. Мы проводим подготовку хроматина и обработку ультразвуком, реакции иммунопреципитации в двух экземплярах (включая отрицательный контроль IP с нормальным IgG), готовим образцы для ЖХ-МС/МС, проводим масс-спектрометрию и представляем окончательный отчет, включающий биоинформационный анализ.

Анализ данных биоинформатики выполняется нашей собственной командой экспертов по биоинформатике, и результаты обобщаются в легком для понимания отчете о проекте.В дополнение к исходным данным отчет по проекту включает «индивидуальный список», который содержит все идентифицированные белки из каждой реакции ИП после удаления фоновых анти-IgG-ассоциированных белков, дополнительный «сводный список», который содержит белки, общие для обоих ИП. после удаления белков, связанных с анти-IgG, и отчета об онтологии генов, в котором идентифицированные белки группируются по функциональным категориям.

Настройка рабочего процесса RIME в вашей лаборатории также возможна, однако это может сводиться к доступу к масс-спектрометру. Если у вас есть доступ к такому устройству или услуге, вам нужно будет найти хорошее антитело, которое работает в RIME. Хорошей отправной точкой является антитело, которое работает в ChIP, которое затем необходимо соединить с гранулами. После оптимизации и выполнения пробоподготовки и МС-анализа необходимо выполнить биоинформатический анализ.

Хотя RIME предлагает преимущества, заключающиеся в возможности изучения эндогенных белок-белковых взаимодействий без необходимости манипулирования образцом на генетическом уровне, а количество необходимого исходного материала значительно снижено по сравнению с историческими методами, все еще есть некоторые проблемы, которые необходимо преодолеть. при выполнении RIME.Поэтому, возможно, стоит подумать о сотрудничестве с экспертами по эпигенетике в Active Motif, чтобы как можно быстрее получить высококачественные данные RIME.

: RIME — отличный способ идентифицировать новые межбелковые взаимодействия на хроматине и открывать новые белковые комплексы

RIME представляет собой новый метод, который позволяет исследователям определять состав комплексов, связанных с хроматином, из небольшого числа клеток за относительно короткий рабочий процесс. Как указано выше, этот метод предлагает преимущества по сравнению с такими методами, как IP-MS или ChIP-MS, которые основаны на манипулировании клетками и сверхэкспрессии «меченых» белков для аффинной очистки, что может привести к ряду недостатков.

Напротив, анализ RIME очищает эндогенные белки без необходимости генетических манипуляций с клетками. Кроме того, протокол RIME допускает строгие условия промывки для уменьшения неспецифических фоновых белков, тем самым повышая специфичность и чувствительность.

RIME также идеально подходит для дополнения результатов геномики, полученных в исследованиях ChIP-Seq, данными протеомики, поскольку и в RIME, и в ChIP-Seq используются одни и те же протоколы фиксации и подготовки образцов.

Свяжитесь с нами, если вы хотите узнать больше о RIME и о том, как работает наш сервис, или запросить расценки.

Об авторе

Стефан Диллинджер, доктор философии.

Стефан родился в Баварии, Германия. После изучения биохимии в Ульме и Регенсбурге он получил докторскую степень. в области эпигенетики, изучая распределение гетерохроматина вокруг ядрышек во время клеточного старения. Будучи аспирантом, он запустил свой собственный немецкий научный подкаст «The Random Scientist» и сейчас является ведущим подкаста Active Motif Epigenetics.Когда Стефан не работает в Active Motif и не записывает подкасты, он увлечен бегом (он пробежал Нью-Йоркский марафон за 3 часа 21 минуту!!) и любит проводить время с женой и сыном.

Свяжитесь со Стефаном в LinkedIn, чтобы задать любые вопросы или получить совет по бегу.

Каковы ваши любимые недавние открытия в области эпигенетики? Мы хотели бы услышать от вас! Пожалуйста, свяжитесь с нами по адресу [email protected] или в Твиттере (@activemotif), чтобы поделиться своими мыслями и отзывами! Мы также ищем научных писателей, которые могли бы внести свой вклад в MOTIFvations, поэтому, если вы являетесь признанным научным коммуникатором или просто хотите начать, свяжитесь с нами — возможно, мы найдем историю, над которой мы могли бы сотрудничать!

Связанные статьи

9 марта 2020 г.
CUT&Tag показывает многообещающие результаты и может смягчить некоторые ограничения чипа, но также имеет свой собственный набор ограничений, которые необходимо учитывать.В этой статье рассказывается, что такое CUT&Tag, и описываются преимущества и недостатки этого метода.

Подробнее

14 июня 2019 г.
Метод RRBS был впервые опубликован в 2005 году, на заре NGS, когда секвенирование было еще дорогим, как способ провести полногеномный анализ метилирования однонуклеотидной ДНК по более низкой цене, чем бисульфитное секвенирование всего генома. В этой статье рассказывается, что такое RRBS и почему он по-прежнему является мощным методом изучения 5-mC.

Подробнее

<< Вернуться на главную страницу блога MOTIFvations

Эксклюзивный анализ истории ETPrime. Прочитайте подробный анализ последних новостей и главных новостей на ETPrime

2022 RAV4 Prime | Возьмите на себя ответственность за свой путь.

Цены и цвета могут варьироваться в зависимости от модели.

{ «seriesType»: «single», «enableGradeSelector»: ложь, «enableNightshadeMode»: ложь, «useBackgroundImages»: ложь, «imageFormat»: «png», «imageIndex»: «2», «imageBackground»: «белый» , «imagePath»: «https://www.toyota.com/imgix/content/dam/toyota/jellies/max», «год»: «2022», «серия»: «rav4prime», «цвет»: «3U5», «комплектация»: «», «отделка «: «», «автомобили»: { «rav4prime_2022»: { «цвета»: { «3U5»: { «индекс»: 0, «код»: «3U5», «комплектация»: «», «имя»: «Сверхзвуковой красный [extra_cost_color] «, «tags»: «», «tooltip»: { «label»: «», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, » trim»: «», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor»: «» } , «1G3»: { «index»: 1, «code»: «1G3», «grade»: «se», «name»: «Magnetic Grey Metallic», «tags»: «Magnetic Grey Metallic», «tooltip»: { «label»: «1g3», «description»: » «, «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «4544», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor»: «» } , «1D6»: { «index»: 2, «code»: «1D6», «grade»: «se», «name»: «Silver Sky Metallic», «tags»: «», «tooltip «: { «label»: «1d6», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «4544», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage «: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor» : «» } , «8X8»: { «index»: 3, «code»: «8X8», «grade»: «se», «name»: » Blueprint», «tags»: «», «tooltip»: { «label»: «», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «4544 «, «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor»: «» } , «040»: { «index»: 4, «code»: «040», «grade»: «se», «name»: «белый», «tags»: «», «tooltip»: { «label»: «040», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «4544», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor» : «» } , «218»: { «index»: 5, «code»: «218», «grade»: «se», «name»: «Midnight Black Metallic», «tags»: «», «tooltip»: { «label»: «218 «, «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «4544», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor» : «» } , «2QY»: { «index»: 6, «code»: «2QY», «grade»: «», «name»: «Крыша Silver Sky Metallic/Midnight Black Metallic «, «теги»: «», «в oltip»: { «label»: «», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage» : «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor» : «» } , «2QJ»: { «index»: 7, «code»: «2QJ», «grade»: «», «name»: » Крыша Blizzard Pearl/Midnight Black Metallic [extra_cost_color]», «tags»: «», «tooltip»: { «label»: «», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: » » }, «trim»: «», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor»: «» } , «2QZ»: { «index»: 8, «code»: «2QZ», «grade»: «», «name»: «Magnetic Grey Metallic/Midnight Black Metallic крыша», «tags»: «», «tooltip»: { «label»: «», » description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», » backgroundColor» : «» } , «2SC»: { «index»: 9, «code»: «2SC», «grade»: «», «name»: «Сверхзвуковая красная/черная металлическая крыша [extra_cost_color]», «tags»: «», «tooltip»: { «label»: «», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaL ink»: «» }, «trim»: «», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor» : «» } , «2RA»: { «index «: 10, «code»: «2RA», «grade»: «», «name»: «Blueprint/Midnight Black Metallic крыша», «tags»: «», «tooltip»: { «label»: «» , «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «» , «backgroundColor»: «» } }, «grades»: { «se»: { «colors»: { «3U5»: { «index»: 0, «code»: «3U5», «grade»: «se «, «name»: «Susonic Red [extra_cost_color]», «tags»: «», «tooltip»: { «label»: «», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink» : «» }, «trim»: «4544», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor» : «» } , «1G3»: { «index» : 1, «code»: «1G3», «grade»: «se», «name»: «Magnetic Grey Metallic», «tags»: «Magnetic Grey Metallic», «tooltip»: { «label»: «1g3 «, «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «4544», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobil eBgImage»: «», «backgroundColor» : «» } , «1D6»: { «index»: 2, «code»: «1D6», «grade»: «se», «name»: «Silver Sky Metallic» , «tags»: «», «tooltip»: { «label»: «1d6», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «4544» , «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor» : «» } , «8X8»: { «index»: 3, «code»: «8X8″, » класс»: «se», «name»: «Blueprint», «tags»: «», «tooltip»: { «label»: «», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink «: «» }, «trim»: «4544», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor» : «» } , «040»: { «index «: 4, «код»: «040», «сорт»: «se», «название»: «белый», «метки»: «», «подсказка»: { «метка»: «040», «описание «: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «4544», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», » backgroundColor» : «» } , «218»: { «index»: 5, «code»: «218», «grade»: «se», «name»: «Midnight Black Metallic», «tags»: «» , «tooltip»: { «метка»: «218», «описание «: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «4544», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», » backgroundColor» : «» } } }, «xse»: { «colors»: { «2QY»: { «index»: 0, «code»: «2QY», «grade»: «xse», «name»: «Крыша Silver Sky Metallic/Midnight Black Metallic», «tags»: «», «tooltip»: { «label»: «», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «4550», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor»: «» } , «2QJ»: { «index»: 1, «code»: «2QJ», «grade»: «xse», «name»: «Blizzard Pearl/Midnight Black Metallic крыша [extra_cost_color]», «tags»: «», «tooltip»: { «label»: » «, «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «4550», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor» : «» } , «2QZ»: { «index»: 2, «code»: «2QZ», «grade»: «xse», «name»: «Magnetic Grey Metallic/Midnight Black Metallic крыша», «теги»: «», «tooltip»: { «label»: «», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink» : «» }, «trim»: «4550», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor» : «» } , «2SC»: { «index» : 3, «code»: «2SC», «grade»: «xse», «name»: «Sussonic Red/Midnight Black Metallic крыша [extra_cost_color]», «tags»: «», «tooltip»: { «label «: «», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: «4550», «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», » mobileBgImage»: «», «backgroundColor» : «» } , «2RA»: { «index»: 4, «code»: «2RA», «grade»: «xse», «name»: «Blueprint/Midnight Black Металлическая крыша», «tags»: «», «tooltip»: { «label»: «», «description»: «», «ctaLabel»: «», «ctaLink»: «» }, «trim»: » 4550″, «desktopBgImage»: «», «tabletBgImage»: «», «mobileBgImage»: «», «backgroundColor»: «» } } } } } } }

под смыслом коварного чуда Tequila Work • Eurogamer.

Предупреждение: в этой статье предполагается, что вы прошли Rime. Если вы этого не сделали, вы должны! Только в конце вы понимаете кое-что очень важное об игре, что делает ее особенной — Rime — это гораздо больше, чем кажется безмятежным средиземноморским приключением. Если это звучит как спойлер, отвернитесь, но, пожалуйста, вернитесь снова, когда будете готовы к большему.

На веранде, согретой средиземноморским солнцем, Рауль Рубио Мунаррис, креативный директор Rime, рассказывает мне момент, навсегда изменивший его жизнь.«Это довольно глупо», — говорит он. «Однажды я чуть не утонул».

Он встречался с девушкой, которая хотела поплавать у берегов Испании, и, желая произвести на нее впечатление, согласился. И вот они начали плыть, и плыть, и плыть в море. Вскоре они были в одном километре, но Рубио был не в своей тарелке. — Мы очень далеко, — крикнул он над водой, его тело устало. «Мы должны вернуться.» Но девушка была невозмутима. «О, да ладно,» ответила она. «Давайте доберемся до этого буя, а потом вернемся.»

Рубио придумал план. Он цеплялся за буй и отдыхал, как это делают люди в кино. «Но все не так, как в кино, — говорит он мне. «Скользко. Я не мог ухватиться за буй и начал паниковать». Он сказал ей, что устал и не может вернуться самостоятельно. На что она ответила: «Хорошо», развернулась и уплыла. «Я был один.»

«Хорошо, хорошо, оставайся спокойным, оставайся спокойным, — сказал он себе, — но я не мог, и у меня случилась паническая атака.Он лихорадочно рванул к берегу, адреналин пересилил его, и через минуту уже выбился из сил. «Я начал, — говорит, — спускаться вниз, тонуть».

Когда он начал глотать воду, он принял свою судьбу. «Это очень глупый способ умереть, — шутливо подумал он. «Удачи с вывозом моей машины из гаража — вы не знаете, где ключи, а это очень узкое место». Но затем на ум пришло еще кое-что, что ужалило: мысль о том, что его родители получают известие об их потере. «Моя глупость заставит их страдать», — подумал он.«Я знаю, что моя мать будет страдать, мой отец будет страдать, мой брат будет страдать». Он хотел сказать им, что все в порядке, не волнуйтесь, но не мог. Это вызовет цепную реакцию и повлияет на всю оставшуюся жизнь, подумал он. «Так быть не должно. Это нечестно.’

Но когда он погрузился под воду, кто-то заметил его руки наверху и поплыл, чтобы вытащить его обратно на поверхность и на берег. Это был брат девушки, с которой Рубио был на свидании, девушки, на которой Рубио позже женится, которая позже объяснила, что думала, что он шутит, когда сказал, что не может обратно заплыть.«Мне повезло».

Но Рубио тоже был огорчен. Он улыбается из-за того, что он «толстый картофель», и из-за слабого пловца он чуть не умер. «Долгое время я был очень смущен и пытался забыть этот момент. Я бы никому об этом не говорил», — говорит он, — поэтому он подавил его, похоронил травму глубоко. «Я не говорил маме до семи лет спустя».

Рауль Рубио Мунаррис является основателем, креативным директором и генеральным директором испанской студии Tequila Works, которой уже почти десять лет и которая вышла на сцену в 2012 году, выпустив хоррор с боковой прокруткой про конец света Deadlight.За ним последовала пять лет спустя — после долгого и бурного развития — Rime. Но это не всегда был тот Райм, который мы знаем сейчас. Когда-то это была Echoes of Siren, игра Microsoft, приключение «Gauntlet, Minecraft, Jason and the Argonauts», согласно просочившемуся игровому полю. Вы были не хрупким мальчиком, а мускулистым мужчиной Кратосом в приключении, похожем на Робинзона Крузо, собирающим и мастерящим днем ​​и защищающим убежище от злых духов ночью. Но планы Microsoft изменились и Xbox сбросил Echoes of Siren, а Tequila Works была вынуждена пересмотреть то, что у нее есть — и это ей не понравилось.«То, что мы делали, было недостаточно красивым и безумным», — говорит Рубио.

Именно тогда, в период переоценки ценностей, возвращения к чертежной доске, подавленное воспоминание Рубио об утоплении снова пробудилось. Во время разговора с писателем Робом Йескомбом все вышло наружу — Рубио даже обнаружил сожаления, о которых он не подозревал, которые он испытывал раньше, а именно о том, что он упустил ребенка. И из лужи горя, страха и вины возникла искра и смысл, которые искала Tequila Works.

Rime — это история отца, проходящего через пять стадий горя, медленно смирившегося с потерей сына, который во время шторма был сметен за борт и утонул. Это душераздирающее откровение, припасенное на конец игры, проливает новый смысл и понимание на все, что было раньше. Это момент, который, естественно, вызывает взрыв внутренних вопросов, и в Интернете существует множество теорий и дискуссий по этому поводу. Таких вопросов у меня не было, когда я встретил Рауля Рубио Мунарриса в прошлом году, вскоре после выхода Rime, но на этот раз они есть.

«О, так ты закончил!» — говорит он, когда я говорю ему, и его лицо светится. И с едва ли приглашением он ушел, в длинное и извилистое объяснение значений Rime, я могу только предположить, что он хотел сойти с ума в течение некоторого времени.

Иней начинается в Отрицании, хотя в то время вы были за миллион миль от его понимания. Вы выбрасываетесь на берег красивого средиземноморского острова, не зная, кто вы и где. «Это как детство в жизни», — говорит Рубио.Вы неосознанны и беззаботны, без срочности или цели распоряжаетесь своим путем. «Вы можете играть сколько угодно», — говорит он, возиться со свиньями, карабкаться и исследовать. Все в порядке, все в порядке. Это ощущение детства, отраженное в игре со светом и перспективой. «Детская логика», — объясняет он. «Ты действительно веришь, что можешь схватить солнце и двигать его — почему бы и нет?» Однако рано или поздно вас привлечет то, что вы не сможете игнорировать, — большое белое сооружение, возвышающееся над островом. «Башня всегда рядом.»

Однако на активацию башни можно посмотреть и по-другому. Ребенок, видите ли, нарушитель мира. Эта фантазия — способ отца баюкать существование своего ребенка в некоем подвешенном состоянии, где он приостанавливает неверие, удерживая безжалостную правду реальности в страхе. Именно ребенок начинает нарушать этот покой и пробуждает подавленные и запертые вещи. «Отцу было легче смириться с тем, что этого не происходит, — говорит Рубио. «Все было счастливо, как Диснейуорлд, но когда вы просыпались, когда вы двигали солнце, остров был недоволен.»

Итак, после того, как мальчик впервые взобрался на башню — и рискнул пройти по коридору через гигантскую замочную скважину сияющего света — мир впервые изменился, и Отрицание уступило место Гневу. Что кажется очевидным — есть гигантская злая птица, которая крадет большой золотой шар, который вам нужен, чтобы решить головоломку. Сценарий, вдохновленный футбольными играми в детстве, говорит мне Рубио, и тот момент, когда вы забиваете мяч в сад сварливого старого соседа. — Могу я вернуть свой мяч? ты спрашиваешь.»Нет, это мое!» они щелкают. Внезапно мир становится горячим, не приятным, как раньше, а пекущимся, треснувшим и опаленным, и именно в этот момент отец, остров, начинает набрасываться.

«Ибо отец — мы зовем его Ману — вспоминает, и его первая реакция: «Мне нужно кого-то обвинить», потому что это не может быть его ошибкой.» Вот почему есть три ветряных мельницы: одна подводная; один из дерева и парусов; и один расписан изображениями мальчика. Они представляют собой то, на что отец пытается свалить вину за свою потерю.«Сначала, может быть, ты винишь море, потому что море унесло твоего ребенка. Потом, может быть, ты винишь лодку, потому что это был твой образ жизни — почему ты не мог быть плотником? Этого бы не случилось! Тогда, очевидно, вы вините своего ребенка — он был неосторожен, он не должен был этого делать, вы его предупреждали».

Ветряные мельницы разрушены бурями — гневом — разбушевавшимся там, и когда они исчезнут, отцу некого будет винить, кроме самого себя. Вот почему птица в ужасе улетает и почему появляются тени, говорит мне Рубио, потому что они и есть то, чем является мальчик, только он еще не знает этого — только отец еще не примет этого.Вот почему они съеживаются от мальчика. «Они боятся вас, потому что вы так отличаетесь от них», — говорит он. «Ты не должен быть таким».

Молния ударяет в птичье гнездо и, загоревшись, преследует мальчика, но падает и умирает. В гневе отец убил его. Он также неосознанно уничтожил яйца в гнезде. «Это и есть сам Гнев», — говорит Рубио. Оно слепо и безрассудно.

На этот раз, когда мальчик взбирается на башню, он оказывается там же, где и начал, на дне, но не в пышном мире, как раньше, а в болоте, «полном дерьма», которое можно найти за диваном.Как отец. Это Торг, где вы ищете помощи у высшей силы — у созданного вами стража, «веб-камеры на ногах», как ее называет Рубио, — чтобы вернуть все на круги своя.

Кто придумал название?

Не Рауль Рубио Мунаррис. Это была даже не идея Tequila Works. Идея названия Rime пришла от Sony, когда у Sony временно была игра в качестве эксклюзива для PlayStation (сбивает с толку, не так ли?). Видите ли, сирена столкнулась с игрой Sony Forbidden Siren, поэтому ее пришлось изменить.

«Продюсер спросил: «Вы знакомы с The Rime of the Ancient Mariner?»», и Tequila Works ответила. — Ты имеешь в виду песню Iron Maiden? «Нет, — уточнил продюсер, — поэма XVIII века…»

Продюсер сказал слегка смущенной команде, что темы стихотворения действительно резонируют с игрой, и это помогло. «Хорошо, мы можем использовать Райм?» — спросил Текила Воркс.

Сейчас шейды агрессивны по отношению к вам, или, возможно, они пытаются заставить вас принять вашу природу как шейда.«Или, может быть, эти оттенки — подавленные воспоминания, ваши плохие чувства по поводу печали и стыда, — говорит Рубио, — и поэтому они выглядят как тени, потому что вы склонны игнорировать и скрывать эти чувства, и когда они проявляются, может быть, они хотят выглядеть как ребенок, верните их моджо».

Пока идет торг, эта лиса и часовой, которых вы оживили, начинают сближаться и начинают оставлять вас в стороне, что совершенно намеренно. «Вы думаете, что во что-то ввязываетесь, но знаете что? Вы не важны, это не имеет значения», — говорит Рубио.Это чувство достигает кульминации в конце «Торга», когда часовые просыпаются и просто уходят, даже не кивнув в вашу сторону. «Ты всего лишь гость», и теперь твоя самооценка подвергается испытанию, когда ты поднимаешься на башню в третий раз и обнаруживаешь, что она затоплена надвигающейся Депрессией отца.

Как визуализировать Депрессия пришла к Рубио во сне. «В этот момент у меня родился ребенок, и я не мог спать в течение двух лет. В одну из ночей, когда я не мог спать, мне приснился странный сон, в котором я был один в мире, и был только дождь, и дождь был слезами. и я ничего не мог видеть.Все было невидимо, — говорит он. — Я не мог видеть окружающий мир, потому что был так глубоко погружен в собственную депрессию».

Это уменьшенная видимость в игре, которая маскирует убегающую лису и стражей, жертвующих собой, чтобы открыть двери для вас. Это как в жизни: «Большинство людей, когда они в депрессии, не замечают людей, которые помогают — они чувствуют, что ими пользуются, и никто их не понимает — и это грустно, потому что эти люди действительно заботятся о них». для вас, но, конечно, вы этого не видите», — говорит он.«Иногда вашим лучшим друзьям нужно чем-то пожертвовать, чтобы вы могли двигаться вперед».

Как бы вы ни старались, вы не сможете остановить последнего стража, созданного вами первым, пожертвовавшего собой у последней двери. И как бы вы ни кричали, вы не можете помешать лисе, которую потом держите на руках, исчезнуть. «Многие говорили мне: «Ты ублюдок! Ты убил лису», — говорит Рубио. «Нет! Ты создала лису, Нана, и лиса выполнила свой долг перед тобой. Ее единственное предназначение в жизни — дать тебе надежду принять свою природу, а природу козленка — тень. «Вот почему тени теперь игнорируют тебя, потому что, наконец, ты один из них, есть дно разума отца, никогда не двигаться вперед.

Но депрессия, какой бы долгой и тяжелой она ни казалась, не длится вечно, и поэтому, достигнув центра Некрополя, вы разрываете свои цепи, и жизнь снова устремляется обратно в мир Иней. «Ты — тень, но ты то, что мы называем Просветленным Малышом — в отличие от других теней. «Знаешь что? Я не исчезну — я останусь.Ты должен принять меня, я часть тебя».

И тогда мир переворачивается с ног на голову, и вы понимаете, что были на вершине башни, и все происходило под водой, и поэтому, чтобы добраться до вершины, вы теперь спускаетесь, а когда это происходит, вы прыгаете. Это момент, который некоторые неправильно истолковали. «О, значит, тебе нужно убить себя», — сказали они. «Нет!» — говорит Рубио. «Башня перевернута. Дно — это на самом деле небо, звезды, поэтому вы прыгаете в небо, вы идете к этим звездам, потому что вы верите в это.Вы буквально выходите за пределы. »

Именно тогда, когда не осталось ничего, что могло бы поддержать фантазию, Райм раскрывает правду. «Вы заметили эту загадочную фигуру в плаще в игре, и вы знаете, что он был на лодке, но понимаете, что это вы, буквально вы». Отец — и теперь вы берете его под свой непосредственный контроль. Вы открываете дверь в комнату своего сына и оглядываетесь на сувениры, которые, возможно, вы собрали в игре, и на милую лису, изображение матери в игре, Надежду — с отцом, фигуру в капюшоне, являющуюся Виной, и мальчик Потеря.Вы поворачиваетесь, чтобы уйти, но внезапно видите призрак мальчика на кровати, и вы бросаетесь к нему, обнимая его, пока, наконец, он не исчезает, и пока вы свешиваете оставшийся кусок ткани из воспоминаний в окно на ветру. , вы принимаете его уход и отпускаете, отправляя его в новый рассвет.

Другая концовка

Какое-то время между главами игры не было сцен снов. Вместо этого игра переходила к рыбаку, отцу, как к рассказчику, читающему книгу сказок якобы ребенку, лежащему рядом с ним в постели. «Вы этого не видели, — говорит Рубио, — но в конце концов кровать была пуста». Это было большим открытием.

«Это было мощно, — продолжает он, — но мы чувствовали, что обманываем. Вы думали, что он читает эту сказку своему ребенку, а теперь ребенок ушел, так что плохо себя чувствует .»

Rime тоже когда-то был язык, который можно было собрать воедино, чтобы расшифровать смысл игры. «Был даже скрытый язык, как в Фесе, где его можно было понять», — говорит он. Но это было слишком очевидно, поэтому вместо них использовались более двусмысленные фрески.

Это значения, как их видит Рауль Рубио Мунаррис, сжатые из тем, о которых он мог бы говорить часами, потому что он очень быстро отклоняется на глубокое и поэтическое касание. Но интерпретации концовок другими людьми различаются. Один человек, например, считал, что Rime — это история Питера Пэна о человеке, неспособном смириться с тем, что его детство ушло, в то время как другие перевернули смысл, чтобы он был о надежде, а не о потере. «Послание для меня, несмотря ни на что, последнее, что вы теряете, — это надежда, и даже тогда вы, так или иначе, дойдете до конца, так что все в порядке», — сказали они.

«Мы получили много-много писем… очень личных писем», — говорит Рубио. Люди рассказывали о детях, которых потеряли, или о близких, которых вот-вот потеряют. В некоторых случаях они даже были теми, кто собирался умереть. Одни искали ответы об игре, другие искали ответы о загробной жизни. Другие, тем временем, поблагодарили Рубио и команду за то, что они помогли им осознать свое горе и форму предстоящего путешествия. «Это были лучшие». А некоторые ничего не чувствовали, что было странно, но потом: «Ваш жизненный опыт необходим для того, чтобы игра работала.»

Как вы следите за такой игрой, как Rime? Это кропотливо сделанное приключение красоты и остроты, которое едва не сломало Tequila Works и не принесло взамен ужасного успеха. Даже выпуск второго шанса на Switch, заказной порт, пошел не так, как надо, и в конце концов потребовалось больше работы для Tequila Works. «В прошлом году, фу!» говорит Рубио. «Это никогда не кончается.

«Мы знаем, как сделать продолжение Rime, — добавляет он, — но это будет не совсем Rime 2, а духовный преемник Rime.Но успеем ли мы? Я не знаю. Может быть, однажды мы сможем вернуться, но пока это слишком рано — любой, кто прошел Rime, может, поймет, почему. Для нас это было очень-очень большое путешествие, и оно было очень напряженным».

Но Tequila Works работает над новыми играми, а студия из 60 человек условно разделена на три команды по 20 человек. «У нас есть несколько проектов, — говорит он. «Другие команды работают над новыми вещами, которые мы начали в прошлом году, но еще слишком рано что-либо объявлять.»

Тем не менее, он говорит, что это будет игра в виртуальной реальности. «После «Невидимых часов» [загадки убийства, которую я рассматривал] мы чувствуем себя очень комфортно в виртуальной реальности. Если в «Невидимых часах» основное внимание уделялось погружению — ощущению, что вы находитесь внутри истории, — в этом случае речь идет скорее о разрушении, в том смысле, что присутствие является ключевым. . Я могу быть внутри истории, но чувствую ли я, что нарушаю историю? Это то, что мы исследуем».

Другая «навязчивая идея», которую исследует студия — Рубио любит говорить о навязчивых идеях — это повествование в песочнице в небольших историях размером со сказку.Что произойдет, если вы сделаете диалог более похожим на геймплей в игре-песочнице и позволите возникать спонтанным событиям? Это то, что Рубио делает каждую ночь, придумывая истории для своего ребенка.

«Для меня история — это матрица, в которой есть персонажи, места и события, поэтому любое изменение моего сына вызовет цепную реакцию», — говорит он. «Мы [Tequila Works] не пытаемся рассказать эту эпическую сагу или что-то в этом роде — в сказках это легко, потому что в них очень мало персонажей, локаций и событий. Вот что я делаю каждую ночь со своим ребенком! И это то, над чем мы сейчас экспериментируем.»

Здесь я оставляю Рауля Рубио Мунарриса на солнечной средиземноморской веранде с видом на хорватское Адриатическое море. Это не совсем Средиземное море, где чуть не утонул Рауль Рубио Мунаррис, но и не в миллионе миль отсюда. И когда я покидаю его, его реальная жизнь снова просачивается в его работу, хотя и из гораздо менее драматичного места, чем с Rime. Я воодушевлен. Как мне не быть? Посмотрите, как хорошо получилось в прошлый раз.

Участок с травами — OSRS Wiki

Участки с травами — это сельскохозяйственные участки, на которых игроки могут выращивать травы. Травы в основном используются в навыке Herblore. Рядом с большинством участков с травами также есть ящик для компоста, лепрекон с инструментами, участок и участок с цветами. Всем травам требуется 80 минут, чтобы вырасти, прежде чем вы сможете их собрать. Для каждого участка требуется одно семя , чтобы начать выращивать этот тип травы.

В отличие от наделов, нет никакого способа защитить травы от болезней, если только не использовать свободный от болезней участок.Игроки могут регулярно проверять травы и при необходимости применять лечение растений, чтобы спасти больное растение. Настоятельно рекомендуется использовать ультракомпост для ценных травяных культур, так как это значительно снизит риск гибели, и вы всегда будете получать не менее 6 трав на одно семя, если оно не погибнет. Оборудование для повышения урожайности, такое как волшебный секатор, также очень полезно для игроков.

Многие патчи с травами обладают уникальными бонусами либо после разблокировки, либо после выполнения требования:

Уровень	Семена	Время роста [n 1]	Опыт			Использование	Средняя прибыль (Ультракомпост и волшебные секаторы) [n 2]
			Завод [n 3]	Урожай	Итого [n 4]
9	Гуамский лист	4×20 мин.	11	12.5	98,5	Ингредиент	−569,12
14	Маррентиль	4×20 мин.	13,5	15	118,5	Состав Курение благовоний	−592,8
19	Тарромин	4×20 мин.	16	18	142	Ингредиент	103.12
26	Харраландер	4×20 мин.	21,5	24	189,5	Ингредиент	5 519,72
29	Клубень подагры	4×20 мин.	105	45	420	Изготовление мачете с лезвием из драгоценных камней Обмен у Санфью на случайные травы	−710 860
32	Семя Ранара	4×20 мин.	27	30.5	240,5	Ингредиент	22 620,92
38	льнянка	4×20 мин.	34	38,5	303,5	Ингредиент	17 167,72
44	Лист ирита	4×20 мин.	43	48,5	382,5	Ингредиент	5 560,08
50	Авантоэ	4×20 мин.	54.5	61,5	485	Ингредиент	14 100,92
56	Квуарм	4×20 мин.	69	78	615	Ингредиент	11 764,88
62	Львиный зев	4×20 мин.	87,5	98,5	777	Ингредиент	20 264,2
67	Кадантин	4×20 мин.	106.5	120	946,5	Ингредиент	13 801,28
73	Лантадим	4×20 мин.	134,5	151,5	1 195	Ингредиент	10 167,2
79	Карликовый сорняк	4×20 мин.	170,5	192	1 514,5	Ингредиент	5883.88
85	Торстол	4×20 мин.	199,5	224,5	1 771	Ингредиент	10 574,12

1. ↑ N×20 мин означает, что урожай будет немного расти каждые 20 минут. Это происходит N раз, пока он полностью не вырастет.
2. ↑ Предполагается, что в среднем 8,56 трав на семя на стандартной (незащищенной) травяной грядке основано на эмпирических данных Herbs/Ultracompost.
3. ↑ Этот опыт можно получить при сборе последней травы, а не при посадке семян.
4. ↑ Предположим, что собрано 7 трав.